水稻小粒矮突变性状与T—DNA插入标签的共分离检测.pdfVIP

中国水稻科学 (ChineseJRiceSci)，2008，22(6)：571～577 http：／／www．ricesci．cn 571 水稻小粒矮突变性状与 T—DNA插入标签的共分离检测 马玉银1，3 张亚芳1 潘存红1 李爱宏1 吴旭江1 左示敏1 陈宗祥1 吴 昌银2 潘学彪1， (扬州大学 江苏省作物遗传生理重点实验室 ／植物功能基因组学教育部重点实验室，江苏 扬州 225009；华 中农业大学 作物遗传改 良国家重 点实验室 ，湖北 武汉 430070；0扬州教育学院 生物化学系，江苏 扬州 225002； 通讯联系人，E—mail：shuidao@yzu．edu．cn) Co—segregationAnalysisBetweenT—DNA TagandCharacterofSmallGrainDwarfMutantin Rice MAYu—yin-u，ZHANGYa-fang ，PANCun-hong ，LIAi—hong ，WuXu-jiang ，ZuoShi-min ，CHENZong—xiang ， WUChang—yin2．PANXue—biao1· (KeyLaboratoryofCropGeneticsandPhysiologyofJiangsuProvince~KeyLaboratoryofPlantFunctionalGenetics，MinistryofEduca— tion，YahgzhouUniversity，Yangzhou225009，China；0NationalKeyLaboratoryofCropGeneticImprovement，HuazhongAgricultural University，Wuhan 430070，China； 。Departmentof Biochemistry，Yangzhou Collegeof Education，Yangzhou 225002，China； Correspondingauthor，E-mail：shuidao@yzu．edu．cn) Abstract：A smal1graindwarf(sgd)mutantwasidentifiedinthesegregatedpopulationfrom aT-DNA—tagriceline． ． Geneticanalysisofthismutantwasconductedforcloningandfunctionalresearchofthegene．MultipleT—DNA insertion copiesinthislinewereconfirmed，andoneofthem hadbeenhomozygousinT3segregationpopulation．Asaresult，itwas impossibletOdetectCO——segregationbetweenthetagandsgdmerelydependedonthespecificPCRprimerfrom T_。DNA inT3 andsuccessivelygenerations．However，aflankingsequencefrom oneofT—DNA insertionsiteswasobtainedbyTAIL-PCR， andwasconfirmedtobeco-segregatedwithsgdin consecutivelysegregatedgenerations． Keywords：T-DNA taggingtechnology；flankingsequence；CO—segregation；rice；smallgraindwarfmutant 摘 要：从T—DNA水稻标签系中发现 1个标签系中出现了小粒矮(sgd)突变性状的分离。为克隆该突变基因和进行 基因功能研究，对该突变体进行了遗传分析。该标签系存在多个插人事件，且 T3代发现 目标突变性状分离系中，另一个非 目标插入事件已经纯合，故特异PCR检测不能确认小粒矮突变性状与T—DNA插入共分离 。但通过TAIL—PCR方法，获