血清蛋白指纹技术在冠心病不稳定型心绞痛诊断中的应用.pdfVIP

血清蛋白指纹技术在冠心病不稳定型 心绞痛诊断中的应用 解放军第306医院中心实验室冯凯郑燕华 张建中 张铭景青萍邹德威 首都医-科大学附属北京文贞医院麻醉科赵文度卿恩明 【摘要】目的采用蛋白质组学新技术筛选冠心病不稳定型心绞痛(unstableangina，uA)病人血 Gilt- 清蛋白标志分子，建立诊断不稳定心绞痛的蛋白分类模型。方法利用SEI_DI—TOF—MS(Surface hancedlaser timeof desorption／ionization0ightIr嘲spectrometry)技术对血清样本进行蛋白质谱分析，以30 例不稳定性心绞痛病人和30例正常人作为训练组寻找差异表达蛋白并建立蛋白分类(诊断)模式 (蛋白指纹)，以44例样本(18例不稳定性心绞痛病人和26例正常人)的质谱数据进行盲法分析，并 对蛋白分类模式的性能进行评价。结果UA病人与正常人血清蛋白组比较后发现了25个差异表达蛋 白，其中13个蛋白在UA病人血清中高表达，12个低表达，软件分析系统利用上述蛋白建立了一个分 类模式，在训练组中敏感性和特异性均为96．6％。盲法分析显示其对UA病人的诊断敏感性为 94．4％，特异性为100％，阳性预测值为100％，阴性预测值96．3％。结论SELDI技术能够有效快速 地从血清中筛选出UA病人相关的标志蛋白分子，利用蛋白模式分类方法对冠心病病人进行风险评估 和冠心病的筛查是一个很有前途的方法。 【关键词l表面增强离子解析电离飞行时间质谱不稳定性心绞痛标志分子 心肌梗死是危及人们生命健康的重要原 306医院冠心病不稳定型心绞痛48例，男28 因之一【1’2】。不稳定心绞痛(unstable 例，女20例，平均年龄49岁(31—75岁)， angina， UA)是急性冠脉综合征最常见的形式，病人 诊断根据2002年ACC／AHA制定的标准b】，且 虽没有发展为心肌梗死，但由于此时粥样硬化 均经冠脉造影确诊。正常健康人60例，收自 斑块处于活动期，斑块溃破和修复处于动态平 306医院体检中心，男32例，女28例，平均 衡，一旦平衡打破就有可能发展为急性心肌梗 年龄46岁(25—70岁)，通过病史和常规检查 死[3]。目前临床上尚没有很好的风险评估和早 排除冠心病和其它心脑血管疾病。 期预警的精确方法H】。SELDI—TOF—MS(Sur—2．分组：样本分为两组，第一组为训练 faceEnhanced1．2tser of Desorption／Ionization——Timeset)包括NA病人和正常健康人 组(Training night—MassSpectrometry，SELDI—TOF—MS)各30例，性别年龄相当；第二组盲法分析组 是最新发展的蛋白组学研究方法[5’6】，研究表 (Blind set)，包括剩余18例NA病人和26例正 明，该法对于疾病的早期诊断具有很高的应用 常健康人。 价值n’83。本研究将采用SELDI技术对不稳定3．样本采集：病人出现症状24小时内采 心绞痛病人血清蛋白组进行研究，寻找其与正 血，全血2—3ml，室温静置3小时，于 常健康人的血清差异蛋白，并利用蛋白指纹方 2500rpm离心5min，血清分装，每管20肚l，冻 法建立不稳定性心绞痛病人的诊断模型。 存于一70。(3冰箱中备用。 对象与方法： 4．试剂和仪器：尿素、乙腈、三氟乙酸、 1．对象：从北京市安贞医院和解放军第 SPA(Sinapinicacid)等均购自Si印aa公司，蛋 ·116·