叶用红恭菜防御镉胁迫分子机理初步研究.pdfVIP

叶用红恭菜防御镉胁迫分子机理的初步研究 张殉孙丽娜 沈阳大学污染环境生态修复与资源化技术实验室，沈阳110044 摘要：由于工矿业等的发展，重金属镉污染日趋严重。如何利用超富集植物治理污染土壤成为污染生态学和 环境生态学研究的热点．本研究以叶用红苯菜为实验材料，针对其对重金属镉的超富集特性，初步研究与其 富集功能相关的分子机理。实验结果显示，通过聚合酶链式反应扩增得到叶用红苯菜金属硫蛋白基因片段。 该基因表达量变化趋势与锅离子胁迫处理浓度变化趋势一致。初步推测叶用红恭菜体内金属硫蛋白基因为植 物抗重金属胁迫的因子之一。 关键词：镉；植物修复；超富集植物；PCR 由于工矿业等的发展，人类赖以生存的土壤受到了严重的污染，这种状况已经对我国的 社会与经济的可持续发展构成严重威胁【lJ。在所有土壤重金属污染中，元素镉由于易被植物吸 收，通过食物链可在人体内大量富集，对生物有机体的毒性仅次于汞[21，因此受到极大的关注。 联合国环境规划署1984年提出具有全球意义的12种危险物中，镉被列为首位【31。因此，对含 镉废水进行有效处理，对镉污染水域、土壤进行修复成为环境治理中越来越突出的问题141。但 是，由于镉、铅、铬等重金属进入土壤后不易分解、转化或富集，以及土壤系统本身结构的复 杂性，使得土壤重金属污染的治理变得十分困难【5l。如何针对土壤的重金属污染进行治理一直 是国际上研究的热点与难点问题，也是我国农业可持续发展和环境质量改善中许多学科共同 感兴趣的问题。在众多修复技术中，植物修复作为一种原位的中、长期修复技术，具有净化 空气、保持水土、减少污染物淋滤、避免地表扰动、保护生态环境、成本低廉、美化环境、 低成本、应用范围广(有机和无机污染物)等优点而备受到国内外的关注，并得到迅速发展【6l。 而作为植物修复技术的核心，超富集植物由于可以富集土壤中的重金属，因此成为污染生态 学和环境生态学研究的热点，具有广泛的应用前景。 本研究以叶用红恭菜为实验材料，针对其对重金属镉的超富集特性[71，初步研究与其富集 功能相关的分子机理。采用改进的水培方法培育叶用红恭菜并模拟重金属镉胁迫污染环境， 获得不同浓度Cd“胁迫下生长的实验材料。利用TaKaRa公司的专用植物总RNA抽提试剂提 取植物总RNA。通过凝胶电泳和风光光度计检测，植物总RNA抽提质量良好，符合实验要求。 通过植物金属硫蛋白基因保守序列对比，设计引物，RT-PCR扩增叶用红恭菜体内金属硫蛋白 基因片段。初步实验结果显示，扩增得到500bp左右的特异性片段。将PCR产物凝胶电泳回 收，连接克隆载体并转化测序。该片段长度为482bp，与已公布的部分植物金属硫蛋白基因序 列进行比对，相似性在89％左右，初步认定该片段为叶用红恭菜金属硫蛋白基因片段之一。 以18S 菜植株体内金属硫蛋白基因片段的表达量。结果显示，处理组基因表达量明显高于空白对照 组；而且目的基因的表达量变化趋势与Cd2+处理浓度变化趋势保持一致。初步推测叶用红恭 菜体内金属硫蛋白基因为植物抗重金属胁迫的因子之一。 参考文献： 【11张玉秀，柴团耀．植物重金属调节基因的分离和功能【M1．北京，中国农业出版社，2006，11：3-4 P ML andDistributionofCadmiuminMazeInbred and J，VanBeusichem 【21 Florijn Upmke Lines【J1．Plant Soil，1993，050)：25-32 【3】李博文，郝晋珉．土壤镉、铅、锌污染的植物效应研究进展【JJ．河北农业大学学报，2002,25(S1)：74-76 一 【4】商平，王丽娜．环境矿物材料治理镉(cd2+)污染研究进展川岩石矿物学杂志，2005,24(6)：681—685 【5】张秋芳，土壤重金属污染治理方法概述明．福建农业学报，2000,15：200·203． 【6】旷远文，温达志，钟传文等．根系分泌物及其在植物修复中的作用阴．植物生态学报,2003，27(5)：709-717 va