转基因小黑杨叶片凋落物对土壤微生物数量影响.pdfVIP

第八届中国林业青年学术年会论文集 分2：林术育种与生物技术 转基因小黑杨叶片凋落物对土壤微生物数量的影响 刘岩 吴迪 屠明明 王秋玉 (东北林业大学生命科学学院，黑龙江省哈尔滨市，150040) 摘要：目前转基因植物对土壤生态系统的影响已经成为转基冈植物释放导致的生物安全性研究的薪热点。 本文针对转Bt一蜘蛛神经毒肽蛋白融合基因小黑杨对土壤微生物结构和数量的影响进行初步研究，为系统 评价转基冈植物释放对土壤微生物的生存状况及其对生态环境造成的风险提供有用的信息，也为今后进一 步的研究提供参考。本研究对叶片凋落物叶际周围可培养5大类土壤微生物一一细菌、放线菌、真菌、固 氮茼和纤维素分解菌进行分离，试验初步证明转基因小黑杨叶片凋落物对土壤放线菌、真菌和纤维素分解 菌数量有显著影响(PO．05)。此外，从6个不同降解时期土壤微生物总量的比例来看，总体以细菌数量最 多，因此，细菌是本研究中土壤微生物中的优势菌群。 关键词；转基因小黑杨，凋落物，土壤微生物，数量 进入21世纪以来，植物转基因技术已开始频繁地渗入到我们的日常生活中，全世界转基因植物 的种植变得越来越普及。转基因植物对土壤生态系统的影响已经成为转基因植物释放的生物安全性研 究的新热点。土壤微生物是土壤生态系统中极其重要的一份子，充当了生态系统中分解者的角色，轻 微的改变就会使生态系统遭到毁灭性的破坏。由于目前人们对土壤环境中微生物和植物之间遗传物质 的自然转化还知之甚少，缺乏对环境中有自然转化能力的细菌种类、数量、转化频率和环境因素等信 息的了解，使得人们对转基因植物是否能带来的生态危险产生更多的疑惑，就目前的研究尚不能给出 明确的结论，一旦转基因植物的大规模种植对土壤生态系统中的微生物的结构和数量产生影响，就会 间接改变生态系统的结构 可能会带来不利的结果。 转基因植物凋落物是转基因植物与土壤生物基因沟通的桥梁，它可以通过土壤微生物和土壤动物 的相互作用而分解变化，为土壤生物提供食物来源和栖境。目前，在转基因植物的检测中经常选择测 定微生物的群落，因为细菌和真菌群落对营养的循环和土壤性质起到至关重要的作用…，而且土壤微 生物群落多样性很小的改变都可能影响土壤的健康和生态系统的功能旧1。 3在研究转基因植物对根际细菌的影响中，发现转基因植物根际的冠瘿碱浓度高于对照， Oger等人b 由此认为转基因植物可能影响根际细菌的生物学环境。吴伟祥等【4。在对转Bt基因水稻的研究中发现与 对照土壤相比转基因土壤中的微生物数量发生了显著的改变。同时，也有学者发现转Bt基因和非转基 因玉米的根际部位的真细菌和菌根群落在总量和活性上都存在明显差异哺1。类似的研究也发现，转基 因抗虫棉种植时间的长短对土壤微生物的数量有不同的影响。同时，在种植转基因抗虫棉的土壤中细 菌、真菌和放线菌数量变化趋势不同，但是造成这种变化的原因尚不清楚‘6’。因此，研究外源基因表 达产物在土壤中的分解、迁移、结构变化，明确转基因植物对土壤微生物群落结构的影响和对土壤中 一些特有微生物功能类群活性的影响具有十分重要的意义。 笔者将转基因与非转基因材料进行土壤埋藏处理，测定埋藏前后可培养的土壤细菌、真菌、放线 菌、纤维素分解菌以及固氮菌等几种土壤微生物的数量。 1材料与方法 1．1材料及来源 本研究试验材料是来自东北林业大学林木遗传育种基地的1年生转Bt一蜘蛛神经毒肽蛋白融合基 因的小黑杨。转基因和非转基因材料均来自同一小黑杨无性系，其中，转基因小黑杨有两个分株(TTI、 TT3)、非转基因对照为一个分株(CK)。 自然条件下树木落叶将落在地面或埋入土壤中。本研究利用实验室模拟自然条件，分别对两个转 基因无性系及对照进行土壤埋藏处理。同时，设置一空白土壤对照，以减小误差。 270 第八届中国林业青年学术年会论文集 分2：林木育种与生物技术 每个叶片样品1-39(鲜样)，均装入尼龙袋袋中，封口后埋入地下10-20cm处。 本试验土壤类型两种：阔叶林地土和针叶林地土。 1。2稀释平板计数法进行菌群数量的测定 埋藏初期，凋落物降解较快，每10天采集一次土壤样品用于土壤微生物培养，1个月以后，每个 月采样培养一次，并计数。 无菌环