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IL35
金属配合物以水解机理对DNA的识别切割
杨频
(山西大学分子科学研究所太原030006)
我们研究组首次发现一个新颖而简单的镁.二乙基三胺(Mg(II)-dien)配厶物能够在生理
一5-1—2t.腺嘌呤脱氧核苷酸(dApdA)。通过采用在体系中加入自由基捕捉剂、无氧充氮实验、
脱水丙二醛产物分析、基因工程中的连接实验、高压液相分析等手段研究发现,切割反应是
h-I;对
通过水解途径进行的,其水解切割符合准一级动力学反应,对于双链DNA,KobI=1.6
10~。Serpersu等Ⅲ得DNA磷酸二酯键水解的准一级水解速率为2X
于dApdA,‰bI=4.7X
X10。16
h-1。考虑温度校正因子后,
10“h+1和Chin等【2l得dApdA磷酸二酯键水解速率为l
我们的体系对瓶者推动水解切害4速率都加速了105倍以上。
1 fortimecourseof DNA(31pM)
Figure Agarosegelelectrophoresispatterns pBR322
l:DNA
cleavagebyMg-dien(2.5mM).Lanes
after mM mM
60rain,120min,240min Tris·HCI,3.1
Mg-dienadded,respectively;Conditions:5
NaCI,pH--9,S70C.
用电喷雾质谱研究了镁一二乙基三胺(M默II)-dien)对单链寡聚核苷酸的断裂切割作用。
最后,通过电喷雾质谱、HPLC、紫外光谱实验、pH电位滴定等对其溶液组分、活性组分及
作用机理进行了认定、推测,求得络合常数10呈KM触。)=2.78:去质子常数为9.55。我们的
发现很可能会给出一种有效的DNA切割的新体系p】。这是迄今为止,发现的为数不多的能
够水解断裂DNA的磷酸二酯键的金属配合物之一.最后,用激光.拉曼光谱研究了
M“IIHien配合物与DNA的反应。
参考文献
【1】Serpersu,E.H.;Shortle,D.;Mildvan,A.S.Biochemistry,1987,26.1289.
Chem.Soc1
【2】Chin,J.;Banaszezyk,M.;Jubian,V:Zou,X.J=Am1989。I1。186.
Pen,Aixin
口】PinYang,Rui Song,Maolin Zhou,
Guo,XiangliMeng,CaixiaYuan,Qinghua
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上Amer.Chem.Soc.(topublished)
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