应用蛋白芯片技术研究HBV慢性肝病中医证型和细胞因子的相关性.pdfVIP

(Neurop01ypeptide 组织中表达最为多见，其次在肝脏，心脏、肾脏和骨骼肌等组织中表达。PEBP被认为是一种新的丝氨酸蛋 白酶抑制剂，丝氨酸蛋白酶参与生长发育、组织稳态的许多过程，可降解ECM成分，促进细胞移行，同时 纤维化组织中发现PEBP的表达量明显低于正常肝组织，推测该蛋白表达的下降可能通过肝组织中复杂的细 胞信号通路影响ECM代谢，导致ECM过度沉积，引起肝纤维化。 KIAA基因编码的蛋白质具有多种生物学功能，可能参与细胞信号转导、细胞分裂、蛋白质合成等n引。 本实验发现KI从0366在肝纤维化组织中表达增加，但其与肝纤维化的关系目前尚不清楚，有待进一步研 究。 本研究所得仅为一初步结果，要确认这些蛋白质是否为肝纤维化相关的特异性蛋白质，尚需扩大样本 数量、鉴定数据和结合其它方法进行确证，同时还需深入研究这些蛋白质的结构、功能及在人肝纤维化发 生发展中所起的作用。 应用蛋白芯片技术研究HBV慢性肝病中医证型 与细胞因子的相关性 ， ● 聂广 吴其恺杨大国 李泽松钟旬华张国良林巧 广东省深圳市东湖医院(518020) 蛋白质芯片技术不仅是蛋白质相关研究中最具有应用前景的—项技术，而且在临床方面有着广泛的应用，尤其 是在疾病的诊断和疗效判定具有很大的应用价值。目前蛋白芯片技术主要用于肿瘤、结核、自身抗体等相关蛋白的 筛选，用于慢陛肝病领域国内尚不多见。本课题通过借助蛋白芯片技术，对与慢性肝病发生、发展密切相关的7种 毒|生肝炎、乙肝肝硬化患者中医证型与7种细胞因子的相关性，为慢性肝病中医“证”的客观化和规范化研究奠定 基础。 1．材料与方法 的PBS，10％BsA，2．5％蔗糖)为本实验室自行配制；Cartisian Array 4000激光共聚焦扫描仪(美国Axon公司)。 ·83· m1 心10Illin后，收集血清，用3个lEP管分装，置一80℃冰箱冷藏待用。另外选取30例健康人群的血清做为正常 对照组。 1．3 西医诊断标准慢性乙型病毒陛肝炎的诊断标准参照2000年全国传染病与寄生虫病学术会议所修订的 《病毒性肝炎防治方案》“1，乙肝肝硬化的分级采用Child—Pugh分类标准，其中轻、中、重度慢性乙型病毒性肝炎 患者各30例，A、B、C级乙肝肝硬化患者各30例。 ， 1．4 中医辨证标准慢性乙型病毒性肝炎的中医辨证分型按照1991年天津会议所制定的《病毒性肝炎中医 辨证标准(试行)》嘲；90例慢性乙型病毒性肝炎患者中，湿热中阻型20例，肝郁脾虚型26例，瘀血阻络型2l例， 肝肾阴虚型14例，脾肾阳虚型9例。肝炎肝硬化的中医辨证参考1993年中国中西医结合学会消化系统疾病专业委员 会洛阳会议所制定的《肝硬化临床诊断、中医辨证和疗效评定标准(试行方案)》标准跚，90例乙肝肝硬化患者中 主治以上医师完成，辨证相符者则纳入为研究对象，不符者则予以剔除。若辨证分型有兼证者则取主要证型。 u pH7．0)稀释为500 5500机器人点样于APES玻片上，每个样品设4个重复，每张玻片 g／m1，用Cartisian 用PBST洗涤3次×15s，晾干备用。为了进行质量控制，同时以500Ilg／m1生物素标记的BSA为阳性对照，用 u BSA为阴性对照。 ．。 无生物素标记的500g／ml p