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瘤胃微生物总DNA提取方法的比较
李旦1’2杨舒黎1罗淑萍2王加启1
(1中国农业科学院畜牧研究所动物营养学国家重点实验室，北京100094；
2新疆农业大学农学院，乌鲁木齐市830052)
摘要：目前如何获得完整的瘤胃微生物总DNA是对瘤胃微生物在分子水平研究中关键的一步。瘤
胃微生物总DNA分子片段很大，大概在15kb～20kb，因此需要选择一种合适的提取方法来获得完全的总
DNA片段。本研究采用物理方法如玻璃珠研磨震荡法、反复冻融法、超声波破碎法、液氮研磨法等，化
学方法如表面活性剂十二烷基磺酸钠(sodium
dodecylsulfate，SDS)、溴化十六烷三甲基铵
Ammonium
(eetyltrimethyl
比较，选择最佳的提取方法，使其符合以后PCR扩增要求以及其它后续研究工作。试验结果表明用玻
璃珠研磨震荡加CTAB提取液的方法、反复冻融加SDS提取液的方法提取的瘤胃微生物总DNA的效果高
于其它方法，并且通过电泳以及PCR检测，所提取的DNA的量适于以后的研究工作。
关键词：瘤胃微生物；总DNA：提取方法
methodsofDNAextractionforrnmen
Comparison microbiology
LIDanJ，‘YANGShu．1i1LUO
Shu．ping‘WANGJia．qil
(1．InstituteofAnimalScience．．State ofAnimalNutrition，C：hinese
KeyLaboratory AcademyofAgricultural
1 830052)
Science，Beijing00094；2．XinjiangAgriculturalUniversity，Urumqi
AbstraetHowto thetotalDNAofrumenmicrobesisthe factorOilmoleculareresearch．The
get key
l
molecularsizeoftheDNAofumenmicrobesis sizeiSl5to need
verygreat，maximum20kb．Therefore。we
tochoosea methodto totalDNA．Inthis choosedsome
optimized get paper，we physicaldisruptionmethods，
as
such beadmill
glass homogenizationmethod，freeze-thawtreatment，ultrasoniclysistreatment，liquidN2
milltreatment somechemical assodium sulfate
etc，and method，such dodecyl
AmmoniumBromidesolutionand themtO
lysozymepretreatment(1ysozyme，proteinaseK)。andcompared
choosethemost onetofitnextPCRandotherresearch．TheresultsshowedthetotalDNA
optimized
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