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静注人免疫球蛋白IgG含量检测方法的探讨 徐英，冯泓，高雪军，何彦林，周海云 (兰州生物制品研究所，兰州730046) 摘要：为了更好地进行生产质量控制，快速、准确的测定静注人免疫球蛋白IgG含量。本文对2001年至2008年 的静注人免疫球蛋白IgG含量检测结果进行了抽样统计分析。分析结果表明：样品加倍稀释后测得的吸光度值与 标准曲线第三点的吸光度值差异无显著意义；样品40倍稀释后测得的lgG含量与样品进行20倍、30倍、40倍三 个稀释度测得的IgG含量的平均值差异无显著意义。从而证明，样品加倍稀释后测得的Ise含量完全能够代表该 批样品的IgG含量，无需进行20倍、30倍的稀释。检测方法会更省时、省力、省材料。 关键词：静注人免疫球蛋白；免疫球蛋白；吸光度 静注人免疫球蛋白中的主要成分是IgG，IgG含加抗体缓冲液48m1)充分搅拌均匀，0．45um膜过 量是考核IVIG质量的一个非常重要的指标。IgG滤。4℃保存备用。 含量的检测方法按2000版《中国生物制品规程》和1．4样品 2005版《中华人民共和国药典》均采用王箐舟等… 由兰州生物制品研究所质量保证部及血液制剂 建立的紫外分光法进行测定。IgG含量按药典要求 室提供。 应不低于标示量的90％，本所规格为509／L。在对2方法 2001年至2008年八年的实验结果观察中发现：样紫外分光光度法测定‘21。 品20倍、30倍稀释后测得的吸光度值大多数在标 准曲线第2、3点之间，而样品40倍稀释后测得的吸 光度值均非常接近标准曲线第3点；样品分别20 倍、30倍、40倍稀释后测得的IgG含量也均很接近 三个稀释倍数IgG含量的均值。为此，对八年的实 五个浓度。 验结果随机提取实验数据进行统计分析，分析结果 3 统计分析 报告如下。 采用配对t检验进行统计学分析‘31。 材料和方法 结果 l材料 1．从2001年至2008年八年的实验结果中随机 1．1正常人血清免疫球蛋白国家标准品 抽取每年的六批检测结果，对其中标准曲线第三点 中国药品生物制品检定所提供，批号为： 的吸光度值以及样品40倍稀释后测得的吸光度值， 950316 进行统计学分析，结果见表1。 1．2抗体缓冲液 从表1中可以看出，经过对每年6组数据的配 称取三羟甲基氨基甲烷(Tris)12．429，氯化钠对t检验，结果显示均无显著性差异。表明样品40 99、聚乙二醇(PEG 6000)509，牛血清白蛋白(BSA)倍稀释后的吸光度值与标准曲线中第三点的吸光度 molfL盐 lg，叠氮钠(NaN，)l克，加水溶解，用1．0 值没有差别，对八年48组数据的配对t检验结果显 酸调pH值至7．4，加水稀释至1000ml。 示：无显著性差异，更加说明，实验中不需做20、30 1．3冻干抗人IgG血清 倍稀释，只做40倍稀释即可。 上海生物制品研究所提供。将冻干抗人IgG血 2．从2001年至2008年八年的实验结果中随机 清按说明书要求完全溶解后，按标示效价取抗人 提取每年的六批检测结果，对其中样品40倍稀释后 IgG血清一定量加抗体缓冲液稀释至抗体最终效价 测得的IgG含量以及经20倍、30倍、40倍稀释后测 为l：4(例：抗人IgG血清效价为l：100，取原液2ml得的IgG含量的均值，进行统计学分析，结果见表2。 ·264· 表1 标准曲线第三点的吸光度值与样品40倍稀释后测得的吸光度值统计学分析结果 Table1 Thestatistic resultsAbsofthethird 011standardcurveand whichwasdiluted40times analyzed