一种聚维酮碘泡腾片控制菌检查方法的探讨.pdfVIP

此，目前对诺瓦克病毒的侵染定殖方式还不清楚；大部分诺瓦克病毒蛋白生物学功能研究不透 彻；检测该病毒的方法对RT-PCR依赖性较大，也没有一种统一的快速检测方法用于该病毒的 检测。由于RT—PCR是近年来成立的监测手段，且应用并不广泛，大部分国家尤其是我国缺乏 诺瓦克病毒流行病学资料的积累。所以，F1前诺瓦克病毒研究的重点是：①广泛收集流行病学 本底资料，掌握目前在本地区流行病毒株的表型和基凶型：②建立病毒的体外增殖模式和动物 侵染模型，研究病毒的发病机制、损伤的病理基础，以标准化临床诊断标准，减少漏诊率；③ 加速病毒侵染的免疫学研究，建立流行株的抗体库，完善免疫学的快速诊断方法。④将舰船诺 瓦克病毒监控列入阚家食源性疾病监控体系。 一种聚维酮碘泡腾片控制菌检查方法的探讨 徐雄利， 林永丽， 刘玉明， 巴剑波 (海军医学研究所，上海200433) 聚维酮碘泡腾片为卜乙烯一2一吡咯烷酮均聚物与碘的复合物制成的一种速溶型制剂，本品 对多种革兰阳性菌、革兰阴性菌等有一定的抑制作用。在微生物限度检企中，常规的方法因不 能完全排除供试液的抑菌作用，使所加入的阳性对照菌受到抑制而不能生长。根据其抑菌作用 的强弱对供试品选择适宜的处理方法制备供试液是有必要的，本试验采用1mol／L硫代硫酸钠 中和法或淀粉吸附法排除其抑菌作用，收剑了较好的效果。 1试验材料 菌种：金黄色葡萄球菌(CMCC260003)、铜绿假单胞菌(CMCC10104)；培养基：胆盐乳 糖增菌液(BL)、营养肉汤增菌液、甘露醇高盐琼脂、十六烷三甲基溴化胺琼脂培养基；均由 中国医药(集团)上海化学试剂公司提供；供试lifI：聚维酮碘泡腾片(自制)；其他：pH5．8 缓冲液(自制)：O．1 mol／L硫代硫酸钠；市售食用淀粉(经105C，4h干热灭菌)。 2试验方法与结果 菌液制备：取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物少许，接种到营养肉汤培养 基内。培养20h后，以10倍稀释成50～100cfu／ml的菌液备用。 ml 供试液制备：取含聚维酮碘1．0g的泡腾片一片，溶于100pH5．8自制缓冲液中备用。 方法一；硫代硫酸钠中和法。参照碘含鲑测定的方法，每100ml供试液中加入过昔的0．1 mol／L硫代硫酸钠7．5ml，均匀搅拌至溶液呈尢色。2瓶营养肉汤(100ml／瓶)及2瓶BL 增菌液(100ml／瓶)中分别加入供试液10ml，其中l瓶营养肉汤中加入金黄色葡萄球菌菌 液，1瓶BL增菌液中加入铜绿假单胞菌菌液，作为刚性对照，加菌遗为50100cfu，另外2 瓶不加菌作为供试品检验。取上述增菌液置 (35±1)℃培养24～48h。分别在十六烷三甲 ·112· 基溴化胺和甘露醇高盐琼脂平板上划线分离铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌。结果见表1。 g， 方法二：淀粉吸附法。取供试液20ml共2份，置2支灭菌离心管中，各加入淀粉8 轻轻搅拌均匀，以500r／min离心5min，取上清液分别均匀加入到2瓶胆盐乳糖增菌液(100 ml／瓶)及2瓶营养肉汤增菌液(100ml／瓶)中，其中l瓶_}{B．盐乳糖增菌液及营养肉汤增菌 液·}一，分另JlDrl入50100cfu铜绿假单胞茼和金黄色葡萄球菌，作为阳性对照。另外2瓶不 加菌作为供试品检验。取上述增菌液，按上法同样操作。结果见表l。 表1 两种方法控制菌检验结果 检出试验菌为“+”，未检出“一”。 方法可行性试验：取供试液20m1共4份，其中两管加入100cfu金黄色葡萄球菌，另 外两管加入100 cfu铜绿假单胞菌，分别按上述两种方法操作，检仓两种方法铜绿假单胞菌、 金黄色葡萄球菌的检出情况，同时，按上法不加菌做空白对照。结果见表2。 表2两种方法可行性试验结果 检}}{试验菌为“+”，未检出“一”。 ·113· 3讨论 聚维酮碘为聚乙烯吡咯烷酮