扶阳泄浊化瘀法中药方剂对小鼠实验性结肠炎免疫功能影响的研究.pdfVIP

一 20一 塑 屯医鍪志2015年01月第37卷第o1期 扶阳泄浊化瘀法中药方剂对小 鼠实验性结肠炎免疫功能 影响的研究 ImpactofYang—strengthening，Turbidity—purgatingandBlood—dissolvingMedicineonImmu— nologicalFunctionofExperimentalColitisinMice 彭慧 ，郑伟琴 ，古冬青 ，万星阳 ，胡邦 ，林宏城 ，苏丹 ，王晓学 ，谢尚奎。，石显方 ，任东林 (1．中山大学附属第六医院，广东 广州 510655；2．广东省深圳市宝安区福永人民医院，广东 深圳 518103) 通讯作者：郑伟琴，广东省深圳市宝安区福永人民医院。Email：1426741603@qq．12011／。 基金项 目：2012年建设中医药强省立项资助科研课题项 目(项 目编号。 关键词：结肠炎；免疫调节；扶阳泄浊化瘀；调节性T细胞 ；实验研究 中图分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号 1000—0704(2015)01—0020—02 溃疡性结肠炎 (uc)是一种慢性、反复发作的非特异性炎症 细辛5g，生石膏15g，知母20g，白头翁15g，苦参 15g，牵牛子 15g， 性疾病，其病因和发病机制尚不十分明确 ，且缺乏有效的治疗手 升麻 10g。 段。目前已知的影响因素主要有环境、遗传、微生物感染 、免疫 1．2 方 法 功能紊乱及精神因素等”．2J，其中免疫因素在 uc发病中的作用 1．2．1 动物模型复制及分组 日益受到重视。人体内的Treg细胞是一群具有负性调节机体免 40只Balb／c(H一2d)雌性小 鼠随机平分为4组：正常对照 疫反应且对免疫应答进行调控的T细胞亚群，在 自身免疫性疾 组、模型组、阳性对照组和温阳方剂组。除正常对照组外，其他 病中主要是通过释放细胞因子 IL—l0和转化生长因子TGF—B 三组小鼠自由饮用3％的葡聚糖硫酸钠 (DSS)水溶液7天 ，复制 抑制效应性T细胞，从而维持机体的免疫平衡和稳定。研究发 DSS小鼠实验性UC模型。 现在 自身免疫性疾病发病过程中，Treg细胞数量减少，免疫抑制 1．2．2 给药方法 作用降低，从而导致免疫失衡，引发 自身免疫性疾病 J。中医将 正常对照组及模型组每天按0．25mL／10g(体重)胃饲生理 UC归于 “泄泻、肠僻、痢疾”等范畴，治疗上一般以健脾利湿 ，疏 盐水，连续7d。阳性对照组按0．12mg／10g(体重)胃饲柳氮磺吡 肝解郁 ，通腑降浊等为主。扶阳泄浊化瘀法中药方剂 (简称温阳 啶，连续7d；腹腔注射环磷酰胺 15mg／kg(体重)，隔天 1次共 3 方剂)根据总体病理性质，以六腑属阳主动、六腑 以通为顺 、胃肠 次。温阳方剂组按0．25mL／lOg(体重)，浓度 lg／mL胃饲温阳方 为多气多m之腑的生理病理特点而设；以扶助阳气为治疗之根 剂，连续7d。 本，同时具有虚实兼调 、降浊升清、行气化瘀、寒热并治；该法主 1．2．3 评价指标 治虚实夹杂、寒热交错 、阴阳失调 、气机逆乱所出现的UC，但治 I．2．3．1 Treg细胞数量检测：(1)外周血Treg细胞数量检测 ： 疗机理 目前尚不清楚。本研究采用病变类似于人类 UC的DSS 各组小鼠摘眼球取血0．ImL于肝素抗凝管中摇匀经处理后取 模型小鼠，观察温阳方剂对模型小鼠结肠炎症的治疗效果以及 100Ixl重悬细胞进行流式测定。(2)小肠PPs中Treg细胞数量 对Treg细胞数量、肠黏膜Foxp3的表达及血清中IL一10、TGF一 检测 ：摘取小鼠全部的小肠段 PPs；将 PPs置于200 目不锈钢网 13水平的影响，探讨其治疗UC的可能免疫作用机制。 上挤压 ，经PBS冲洗及 CD4一FITC、CD25一ApC各 10l，4℃孵 1 材料与方法 育20min，PBS洗涤 2次，重悬细胞，流式测定。 1．1 实验动物及