Wistar大鼠脑和脊髓微血管周细胞的分离、培养、鉴定及其功能差异的比较.pdfVIP

工 生 物 医 学 程 研 究 JournaofBiomedicaEngineeringResearch2…0J4-。33(1J】：。l一5 ournalofBiomedical Lg Wistar大鼠脑和脊髓微血管周细胞 的 分离、培养、鉴定及其功能差异的比较 武清斌，荆瀛黎，苑晓晨，李宏伟，修瑞娟△ (中华人民共和国国家．2-生和计划生育委员会微循环重点实验室； q-国医学科学院北京协和医学院微循环研究所，北京 100005) 摘要：探讨Wistar大鼠脑微血管周细胞(brainmicrovascularperieyte，BMP)和脊髓微血管周细胞(spinal cordmicrovascularpericyte，SCMP)之间的差异。运用超高速离心法获取脑和脊髓微血管，再用周细胞培养 基培养，使周细胞爬出，然后用NG2和PDGFR3[鉴定周细胞，用鬼笔环肽着染F—actin，用流式细胞仪测定 细胞周期，用免疫印记分析实验测定周细胞功能蛋白。结果表明：两种周细胞的形态有明显差异，BMP表达 的F～actin显著多于SCMP，两种周细胞的细胞周期无显著差异，BMP相比于SCMP表达更多量的 —SMA、 NG2和PDGFR3[。更多的了解两种周细胞的异同点，为研究其在中枢神经系统生理和病理状态下的作用奠 定基础。 关键词：脑微血管周细胞；脊髓微血管周细胞；中枢神经系统；超高速离心；功能蛋 白 中图分类号：R318 文献标识码 ：A 文章编号：1672-6278(2014)O1-0001-05 Isolated，Cultivated，IdentifiedandComparisonofBrainand SpinalCordM icrovascularPericytesfrom W istaRats WUQingbin，JINGYingli，YUANXiaochen，LIHongwei，XIURuijuan (KeyLaboratoryforMicrocirculation，MinistryofNationalHealthofChina；InstituteofMicrocirculation， ChineseAcademyofMedicalSciencesPekingUnionMedicalCollege，Bejiing100005，China) Abstract：Tocomparethedifferentcharacteristicsofbrainmicrovascularperieytes(BMP)andspinalcordmicrovacularpericytes (SCMP)，theywereisolated，culturedandidentified．High—speedcentrifugalmethodwasusedtoobtainthemicrovasselsfrombrain andspinal cord．Thenthemicrovesselswerecuhivatedinthepericyte—specificmedium．Pericytewasisolatedfrom themicrovessels． NG2andPDGFR[3wereusedtoidentifythepericytes．FITC—labeledphalloidinwasusedtostainF—actin．ThecellcyclesofBMP andSCMPweredetectedbyflow cytometry．WesternblotassaywasappliedtOanalyzethefunctionalproteinsofpericytes．Theresults indicatedthatBMPspossessedbiggercellnucleusandmoreunfoldedcytoplasm thanSCMPs．BMPsexpressedmuchmoreF—actin thanSCMPs(P0．01)．Therew