浅论细胞悬浮液冻干与普通溶液冻干异同.pdfVIP

第^届全国冷冻干燥掌术交流会 2005年11月25—26日中国上海 浅论细胞悬浮液冻干与普通溶液冻干的异同1 张绍志周新丽陈光明 (浙江大学制冷与低温研究所，杭州，310027) 摘要：哺乳动物细胞的冻干是近年来的研究热点，大多数研究与冻干保护剂相关。本文从热 力学和传热传质角度分析了细胞悬浮液与普通溶液在冻干三个主要环节(冷冻、一次干燥、 二次干燥)的异同，提出了细胞的冻干研究中有待注意的一些问题。 关键词：细胞冻干溶液传熟传质 of cells mammalianisOnfoellsofscientists．Mostoftheresearch Abstract：Lyophilisation concem this aremadebetweenthe of lyoprotectants．Inpaper,comparisons ordinary freeze—drying solutionandthe ofcellsolutionfromtheviewof andheatand freeze-drying thermodynamics masstransfer．Thedifferencesthreemain and during steps，freezing，primarydryingsecondary relevanttothe ofmammaliancellslife drying，areanalyzed．Someproblems lyophilisation mentioned． Key andmasstransfer words：ceU，1yophilisation，solution，heat 1引言 用冷冻干燥法保存食品、微生物，疫苗是一种成熟技术…。但是，将冷冻干燥法用于哺 乳动物细胞的保存，长期以来获得的成功十分有限，其原因是哺乳动物细胞结构要比普通微 生物复杂得多。最近几年，根据生物学研究中的发现，人们采用海藻糖作为保护剂，哺乳动 物细胞冻干取得了令人兴奋的进展”73’。其中，用冷冻干燥法保存血细胞是研究得最多的， 因为相比常温和低温保存，这种方法保存的血细胞具有保存时间长、储存运输条件相对简单 的优点_‘6】。有鉴于此，将冻干法应用于其它哺乳动物细胞的长期保存的研究也越来越多tT,a】。 目前，对于哺乳动物细胞冻干的研究主要集中于保护剂，如海藻糖的保护机理、其它形 式的保护剂。虽然也有人研究了冷却速度、搁扳温度、冷阱温度等因素对于复水后细胞存活 率的影响，但在机理上进行解释的很少。作为尝试，本文将从熟力学和传热传质角度对细胞 悬浮溶液和普通溶液的冻干过程进行比较。由于普通溶液的概念广泛，取蛋白质(是许多药 物的有效成分)溶液为例。 2细胞悬浮液冻干与普通溶液冻干的异同 从物理组成上来看，细胞悬浮溶液和蛋白质溶液的最大区别是，后者是均匀的，而前者 是不均匀的。这里判断是否均匀的尺度级是“m，因为冷冻过程中生成的冰晶的大小在这个 数量级。细胞存在一层膜，这层膜将细胞内外的物质隔离开来，水和一些渗透性的溶质可以 穿过这层膜，而盐和蛋白质等一些非渗透性的溶质难以穿过这层膜。细胞悬浮溶液和蛋白质 溶液在物理组成上的差别将导致冻干特性的差别。由于冻干过程可以分为三个阶段：冷冻、 一次干燥和二次干燥，下面将就这三个阶段分别展开叙述。 在冷冻过程中，溶液中的水不断结成冰．剩余的溶液不断浓缩，最后转化为玻璃态的形 本文得到浙江省留学回国人员基金资助 第