黄芩苷在大鼠体内的药物动力学研究.pdfVIP

第24卷增刊 分析测试学报 Vol_24 2005年9月 FENXICESHI ofInstmmenial 2005 XUEBAO(JournalAnalysis) Sep 黄芩苷在大鼠体内的药物动力学研究 邢杰1，陈笑艳h2，钟大放1’2 (1沈阳药科大学药物代谢与药物动力学实验室，辽宁沈阳110016； 2中国科学院上海药物研究所药物代谢研究中心，上海201203) 黄芩苷为黄芩素的7-0-葡萄糖醛酸结合物，是黄芩的主要有效成分，在临床上主要用于抗菌消 炎和抗感染，亦具有抗炎和抗变态反应等多方面的作用。关于黄芩苷在动物体内的吸收程度报道间 差异较大，但多数研究认为，黄芩昔吸收较差，并认为黄芩苷只有通过肠菌群水解为黄芩素后才教 吸收。近年来，随着国际上对黄芩药材的逐渐开发利用，对黄芩苷的研究以及认识也需进一步深 入，有必要对黄芩苷的体内过程进行再研究。本文拟采用LC—MS／MS法研究黄芩苷在动物体内的 吸收动力学过程，以期阐明黄芩苷的吸收机理，为黄芩苷的剂型设计，为临床合理用药提供参考。 1 实验部分 1．1药品与试剂 黄芩苷(纯度大于98．3％)原料药购自四川什邡制药厂；黄芩素(纯度大于99．5％)和大豆菅元 自Sigma公司；甲酵和乙腈为色谱纯；其他试剂为分析纯。 1．2仪器 美国ThermoFinnigan公司TSQ 源(ESI)以及Xcatiburl．4数据处理系统；日本岛津公司LC—lOAD输液泵。 1．3实验动物 Wistar大鼠，雄性，体重256±10g，由沈阳药科大学实验动物中心提供。动物分成3组，每组 6只，分别静脉注射(37 i．LmoL,／kg)、门静脉注射(37lmmoL／kg)、灌胃(224gtmoL／kg)给予黄芩苷。 1．4色谱条件及质谱条件 分析柱为Diamonsil x4．6mmLD．，5／．tan，北京迪马公司)；测定黄芩苷原形的流动 Cls柱(200 代谢物总量的流动相为乙腈一水一甲酸(体积比50：50：0．5)；流速为0．5mL／min；柱温为室温。 离子源为电喷雾离子源(ESI)；采用正离子检测方式；离子源喷射电压4．0kV；毛细管温度320℃； 碰撞气(Ar)压力1．0 Arb；辅助气(N：)压力5Arb；采用选择离子监测 reTort；鞘气(N：)压力35 271m／z (SRM)方式进行测定；用于定量分析的离子反应分别为m／z447—m止271(黄芩苷)，m／z 255--·．m／z 225，253(黄芩苷苷元黄芩素)，m／z199(内标大豆苷元)。 1．5血浆样品处理 黄芩苷的含量测定：取血浆样品50“置于带塞试管中，依次加入内标大豆苷元(1．0斗g／mL) 50 mol／LHCt25 8，振荡 IzL，甲tgS0 ILL，混匀，加入3mL乙酸乙酯，涡流混合15 IrL，0．1 10 000 min，离心5min(2r／win)。分取有机层置于另一带塞试管中，于40℃氮气下吹干。残留物 用lOOlzL流动相溶解，取20曲进行Lc—MS／MS分析。黄芩素总量的含景测定：在50灿血浆样 OOO 品中加入50 U／mL，pH5)，充人Ar气后，盖试管塞，避光，37℃水 p,L口．葡萄糖醛酸苷酶(1 mol／LHCl 浴孵化8h，取出孵化液，加入内标大豆苷元(1．0斗g／mL)50止，甲醇50灿，0．I