不同季节锯缘青蟹(Scylla+serrata)内表皮N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力与性质的比较.pdfVIP

全国农业生化与分子生物学会第八次学术研讨会论文集 化pNP．NAG水解反应的影响。研究显示患病对虾肝胰腺NAGase的酶促反应最适温度37 ℃，而健康虾肝胰腺NAGase的最适温度为40℃，对虾患病后肝胰腺NAGase的最适温度 有所下降。进一步研究酶的热稳定性变化，取两种不同来源的肝胰腺NAGase在不同温度下 保温30rain后，在37℃的测活体系中分析剩余活力，结果表明对虾肝胰腺NAGase在患病 前后热稳定性也发生了变化。 2．4健康与患红体病对虾的肝胰腺NAGase的动力学参数比较 5．2的缓冲体系下，测定不同来源肝胰腺NAGase的酶促 以pNP。NAG为底物，在pH 反应动力学参数。结果表明患病虾的肝胰腺NAGase的k、‰及活化能Ea值均比健康虾 的高，说明患病后酶对底物亲和力变小，酶的催化能力下降。 3讨论 凡纳滨对虾肝胰腺NAGase与食物消化吸收密切相关。红体病是对虾养殖过程最易感 染的流行病之一，患病时对虾食欲不振，摄食量大减，消化道特别是胃不饱满，体形消瘦， 甲壳变软，脱壳不久死亡。部分病虾甲壳与肌肉容易分离，肠道发红，并且肿胀。在哺乳动 物内，NAGase含量及活力变化常作为疾病诊断的指标，故研究对虾患红体病前后体内 NAGase性质变化对疾病诊断具有一定的借鉴作用。我们研究发现对虾患红体病后壳膜 NAGase比活力有轻微的上升．这与患病症状甲壳易分离的症状相符，患病后壳膜NAGase 的基本性质也发生明显变化，暗示该酶可能与对虾患病具有相关性。本文进一步研究凡纳滨 对虾患红体病前后肝胰腺NAGase的变化，研究结果显示凡纳滨对虾在患红体病后肝胰腺 NAGase比活力发生较大幅度地下降，这与患病症状食欲下降相一致。患红体病后肝胰腺 6．0—7．0较窄的范围内具有稳定性。患病后肝胰腺NAGase催化底物 性差不多，均在pH pNP．NAG水解的最适温度为37℃，而健康虾的最适温度为40℃，说明患病后肝胰腺 水解反应的如、％及活化能E患病后均增大，说明患病后肝胰腺NAGase对底物的亲和力 变小，即跟底物的结合能力减弱，酶的催化能力下降。研究结果进一步暗示酶与对虾患病可 能存在着密切关系，有待进一步的深入研究。 不同季节锯缘青蟹(Scyllaserrata)i勾表皮N一乙酰一p．D-氨基葡萄糖 苷酶活力与性质的比较 颜雅雯1，王勤1石艳1。谢进金2，陈清西¨ (1厦门大学生命科学学院、细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室。福建厦门．361005： 2泉州师范学院生物系，福建泉州362000) 摘要；研究同一生长期不同季节的锯缘青蟹内表皮N．乙酰．B．D．氨基葡萄糖苷酶fNAGase， EC 3．2．1．52)的活力与部分性质。结果表明；锯缘青蟹内表皮NAGase活力变化的趋势表现出 一定的季节性规律：在一年当中，酶活力较高的月份为10．12月；其中3月份的活力较低，然 后活力逐渐升高，直至11月，活力达到最高，此后又逐渐减弱。研究该酶的基本酶学性质， 在不同的季节表现都比较稳定，最适pH在5．6-5．8之间，pH稳定性维持在5．0．10．0：最适温度 65 全国农业生化与分子生物学会第八次学术研讨会论文集 为45℃，温度稳定性的研究表明，在大于45。C的条件下酶活力逐渐丧失。 关键词：不同季节；锯缘青蟹；内表皮：NACrase；活力：性质 锯缘青蟹(styli,,serrGKl)，是我国沿海重要的海洋经济蟹类之一。甲壳动物在生长发 育过程中须经历几十次蜕壳，只有顺利完成蜕壳之后体长和体重才得以迅速增加。在蜕壳期 间容易受到病原体，金属离子、有机溶剂等水体污染物的影响，从而影响其正常的生理活动 与物质代谢，导致疾病的发生，因此青蟹在蜕壳期间的发病率和死亡率是各时段中最高的。 国内外的系列研究表明，甲壳动物体内的NAGase在协助生物体顺利完成生理周期性蜕壳具 有重要的生理功能。张继平等对青蟹内脏NAGase的研究做了相关的报道。但是，对与青蟹 蜕壳过程密切相关的内表皮NAGase的研究还鲜有报道。因此，本文以不同季节青蟹内表皮 为材料提取NAGase，探讨该酶活力与相关性质的季节性变化，研究结果对青蟹人工养殖在 环境因子和季节性(时