高纯度西罗莫司的制备.pdfVIP

高纯度西罗奠司的制备 耪霭龌汪丹云黄捷余辉程无荣 (福建省微生物研究所福州350007) 攘薹： 研究蘸罗莫司工艺，特剐是改进化学提取纯化步骤，使透罗莫司纯度高达99。8％， 的质量要求。 关键词； 西罗莫司；杂质；高纯度 FC904)发酵产生强效 从福州土壤串分离到酶吸水链霉菌FC904(Streptomyceshygroscopicus 藐动物雷帕霉素靶袋)，麸瑟攘期淋陛缨臆酶生长和增殖，馋雳机制与繇孢素和FK506不同。 目前西罗莫司已作为器官移植抗排斥药物、治疗冠状动脉再狭窄的支架涂层应用于临床；它的 半合成衍生物替西罗奠司是新分子靶位抗肿瘤新药，也已应用于临床口“3。由福建科瑞药业生 产的鹾罗莫司原料药纯度硼．；c)超过99％，远销国外市场。隧着对药品质量要求的提高， 对菜些特殊用途的药晶往往要求对单个杂质含量进行控制，因此如何减低菲常微少的杂质个数 和单个杂质含量、提高药品纯度是药品质量研究的方向。本文报恩通过工艺改革，西罗莫司纯 度高达99．8％，HPLC图谱中相对保留时间(褂疆)为1．19的微燕杂质含量稳定控制在0．05％ 酸下。 1材料和方法 1．1西罗莫司产生菌：吸水链霉菌FC904--33151,福建省微生物研究所保存。 1．2西罗莫司豹发黧——16L自动发酵罐进行 NBS 发酵罐：SF-116 斜面孢子培养基及培养条件、种子培养基、发酵培养基见文献5。 吸水链霉菌FC904咱孢予—j种子培养基堡≮糍警‰ 搅拌转速：100～400rpm 1．3鹾罗荚司鳃提取缝讫 。鬻蒜岽一刖一渤 破胶：200～3∞鬻，青趱海洋纯工厂出晶。 发酵滚经离心爱褥剿萤丝舔。蓠鍪薅舔滔耩分囊i曼逛嚣次，离·纛蠡，酒精浸涟滚合莽，经 减压浓缩去除瀵精。浓缩灌攥己酸乙酯分别攀取两次，合并纛戆层。魄秘NaCl溶液洗涤～次， 燹水Na2S04干燥-4,时后，过滤，减压浓缩除去己酯得上柱液。上柱液溶予适当体积的洗脱 裁(乏黪一磊漓醚浚髓系统，2∞～3∞鼋磋胶鞋艨褥，分段收集，HPLC检溅，奁并禽瑙罗 黧司静洗麟液，减压浓缩，浓缡滚经乙醚嚣黟，洗螽，手澡褥嚣罗冀霹缝潞。 1．4离纯度嚣罗樊司的铡备 经上述刽餐蹲西拶莫霹溶于少薰瓣洗脱裁，硅黢(2∞～3∞霹)柱屡橱分离，分部收集， 分离避穗搿舞效液穗鞭踪检测。合并禽疆爹葵霭器浚麓液，减压浓缀，浓缩液经乙醚结鑫，漉 燕，垂结鑫褥蹇纯度嚣罗莫霹。 l。5艘lC检测 惫谱袋；Shima救u芰￡-麴10CHT X250ram) 色谱棱：羹溆髓蠢si|Clg色谱柱5蓼mA，6min 流动榴：甲醇：乙腈：水(为：15：30) 流 速；lmF蠹娃n 捡嚣波长：277nm 柱 澄#40s℃ 离效液相色谱使用的溶剂淹色谱缝。 霪 缕莱 2；l西罗葵司的发酵 谣罗莫司发酵滚I-IPLC检测表暖，吸水链霉菌FC9雠--33发酵熏产物为蹰罗莫犀，举产生 恧器剩受羹素，戳产耪洋摄榄寨熬含囊壤徽。 2．2霆箩莫司搬敷缝纯 按1．3节方法对发酵液进行提取、纯化，得到西罗奠司结晶暴。瑚?LC势析表瞬，拦罗夔 霭鲢度达劐99．6％，符会药孀蔼罗莫溺质量标准，霹骐作为商晶出秘。然蔼，嚣箩葵霉结最最 审熬2个徽鳖杂质[RRT(耱对豫警露麓)分嬲为0．79窝1．1绷禽量均丈子0。l％(瘸l，表1)， 添不熊达到特殊溺途豹质量要求。 譬盘￡。(RlHl_tl 翻I露罗羹司绪黼鼯的HPLC分树豳港 袭1西罗莫闭结晶品HPLC谱中各成分的含量(％) 2．3嵩纯度西罗莫谣麓制备 2．3。l硅胶柱层析 选用异丙醇——石油醚、丙酮——2．氯丁烷、乙酸乙酯——石油醚等洗脱系统对西罗莫司 结晶麓重薪进行柱豢析缀难减低鼹今微量杂质的食鲎。 采用丙酮——石油醚系统，对结晶品进行硅胶层析，样品的质量得到提高，RRT秀1．19 的微量杂质的含量均低于0．05％。 2．3．2高纯度西罗莫溺的艘I￡分