cDNA末端快速扩增技术研究进展.pdfVIP

第9卷第4期f专辑， 生◆井季研宽 VoL9No．4(Specia【-∞ 2005年12月 LifeScienceR∞∞陀h Dec．2005 cDNA末端快速扩增技术研究进展 王燕，刘艳艳，杨永清，崔建美 (上海市针灸经络研究所．中国上海200030) 擅蒌：奎长cDN^的麓得是基目克隆的t妥^客．也是鲞圈扭研宽中的一十t薹方面．eDNA木墙快建扩增 技木(R^cE)是芟得奎长eDNA的主妥辅动手J殳之一。从IL4．CE的原理出走，糟出谊技束本身存在的优赡，量．阚 逆RACE曩伟中不客怠税的麓术要点。时霄人圩RACE的改迁，I以怎靖． 关t司：PACE；‘日克隆；套长eDNA 中田分竟号：Q75 文越标识玛：A ：t：Itliq：100707847(2005)S1-0031-06 Ends in ofeDNA ProceedingRapidAmplification WANGYen．LiU Jian-mei Yah-yah．YANGYong—qing，CUI (Sh,u：ghai脑Ⅷ吐Insdaae哆‘^clIPMc‘m口村Men,f／an．瓢Ⅲ暑^缸200030．Chtna) of eDNAis bothto to full-length cloning．and researching．Rapid Abstract：Acquision importantgene genomie ofeDNA oneofresearchinthisfield．The and end(RACE)isways advantagesshortcomings amplification RACE w(!ro outand801rle technicalinRACE inthe pointed points previous amplification important protocols researchweltsummarized． eDNA Keywords：RACE；genecloning；fullIength (蜥sc拓r柳忍删，2005。9(4)：031—036) of 良3个连续的酶促反应步骤(逆转录、Tdlr加尾、 eDNA末端快速扩增(rapidamplification eDNA ends．RACE)技术是基于PCR技术由已知PCB扩增)等．对RACE技术进行改进．本文从 RACE技术的基本原理和特点出发．包括其方法 的部分eDNA序列来获得完整eDNA序列的一种 方法。为Frohmanc。I在1985年首次报道．该技术的学的改进、进展作一综述． 出现解决了PCR扩增效率低和特异性差，不易得 1 RACE的基本原理、方法和特点 到完整的全长基因(包括5’和3’非翻译区，特别 在基因的5’端)的同题．它可以从低丰度的转录 王．1原理方法 本中快速扩增eDNA的5’和3’末端．近年来围绕 RACE技术是以聚合酶链反应(PCR)技术为 着减少非特异性扩增产物或截短的产物背景、改