伸筋草醇提物对佐剂性关节炎大鼠治疗作用的实验研究.pdfVIP

伸筋草醇提物对佐剂性关节炎大鼠治疗作用的实验研究 尹丽颖边晓燕韩玉生苗兵 吕衡 (黑龙江中医药大学哈尔滨150040) 关键词；类风湿关节炎；伸筋草：治疗 类风泓关节炎(RA)是一种以关节及其周围组织炎瘢为特征，以慢性、多发性、对称性关节肿痛 力主要表现麓翥觅全身性翻身免疫疾病。中药伸筋孳具有撩风除湿，舒筋活络之功效是临滚应耀历史悠 久、疗效确切的治疗风湿痹痛的药物n1， 1材料与方法 1．1实验动物 清洁级Wistar大鼠，雌雄吝半，体重180_209，黑龙泼中医药大学实验动物孛心提供。 1．2药物 伸筋革醇提物由黑龙江中医药大学实验中心制备提供：甲氨喋呤(仙居制药有限公司，批号： 040142)；将上述药品分别用l％CMC2Na溶液配制成混悬溶液备用。 |3试裁 弗氏究全佐剂(FCA)，美国Sigma公司，批号：122k8927。 1．4仪器 徽镜。 1．5分组与造膜 将56只 1．6给药 造模7天螽开始灌露绘药，每基一次，每次lml，{孛委菊组予含生药爨mg／ml，搏菱低缝予含生药 盐水。 1．7取材 绘药2l天惹将上述各组动物分别取皮分离盎清，待类风湿因子检溅，然后将各组动物窳醉分别置 于超净台上，仰位固定，取右足踝关节处滑膜，分别放入4％多聚甲醛和3％戊二醛中固定。光镜样品制 备：常规石蜡包埋，切片，=甲苯脱蜡，HE染色，待光镜观察。 电镜样品制备：戊二醛前阉定，PBS缓冲液冲洗，1％锇酸后固定，PBS缓冲液冲洗，乙醇、丙酮梯度 脱窳，环氧树脂618浸透、包堙、聚合，半薄切片定位，超薄切片，醋酸双簸铀、枸橼酸镪双重染琶， 待透射电镜观察悖’。 1．8统计学处理 类风湿因子检测所得务组数据以均数±标准差(J±岛表示，spssl0．O统计学软件进行分析，组问数 据毙较采鲻t检验。 2结果 91 2．1各实验组对AA大鼠血清类风湿因子的影响 注：与正常组相比，木尸0．05，料尸0．01；与模型组相比，#尸O．05，##尸0．01。 2．2光镜观察所见： 正常组：关节软骨表层细胞较少，呈单个分布，深层细胞较大且成行分布，多层滑膜细胞排列较为疏松。 模型组：淋巴细胞、浆细胞及巨噬细胞明显浸润，滑膜细胞明显增生，滑膜细胞增生形成的成纤维细胞、 小血管和炎性细胞侵入形成的肉芽组织导致软骨表面糜烂、溃疡，并有软骨细胞溶解死亡，软骨和骨骺 破坏。 甲氨喋呤组：滑膜细胞增生不明显，偶见淋巴细胞。 醇提各组细胞形态较模型组均有改善，可见不同程度的滑膜细胞增生及炎细胞浸润。软骨细胞、骨细胞 形态基本正常。尤以伸乙低组效果最佳，可见软骨细胞、骨细胞形态正常，滑膜细胞增生及炎细胞浸润 较模型组明显减少。 2．3电镜观察所见： 正常组：滑膜细胞细胞膜完好无损，胞质内线粒体无肿胀变形，嵴突清晰，粗面内质网丰富无扩张，核 膜清楚，染色质分布均匀。 模型组：滑膜细胞增生，细胞膜不完整，线粒体肿胀，嵴不清甚至消失，粗面内质网扩张明显，细胞核 深染或核形不整，滑膜层可见大量粒细胞浸润并伴有胶原纤维增生。 甲氨喋呤组：滑膜细胞胞浆轻度水肿，线粒体偶有肿胀，嵴突破坏不明显，粗面内质网略有扩张。 醇提各组细胞形态较模型组均有改善，可见不同程度的滑膜细胞水肿，线粒体嵴突略有破坏或线粒体仅 肿胀，嵴尚清晰可见，粗面内质网较丰富。尤以伸乙低组效果最佳，可见滑膜细胞线粒体无肿胀，嵴突 较清晰，粗面内质网减少，核膜清晰完整，未见粒细胞，可见少量淋巴细胞。 3讨论 目前，普遍认为RA为一种自身免疫性疾病，其发病与免疫异常有密切关系，大鼠AA模型是典型的 免疫性炎症模型，其特点是多发性关节炎，其发病机制和病理特征与人类RA相似，故多将其作为研究 RA的模型¨’。研究表明伸筋草醇提物能够有效抑制滑膜细胞炎症，改善从大鼠滑膜细胞线粒体及粗面 内质网的功能状态，具有显著的抗炎修复作用。