水稻灌浆期干湿交替处理下籽粒定量代谢组学及蛋白组学分析.pdfVIP

水稻灌浆期干湿交替处理下籽粒定量代谢组学及蛋白组学分析 李忠 张志兴 赵宏 林文雄 福建农林大学农业生态研究所，福建福州350002 摘要：以大穗型水稻品种金辉809为材料，研究籽粒灌浆期干湿交替处理对水稻籽粒灌浆的影响，旨在揭示水 分调控对水稻籽粒灌浆的作用机制。本研究首先运用GC/MS技术对籽粒代谢物进行相对定量分析，进而应用 Heatmap，PCA，SAM，Opls-da和Metpa等数据分析方法，对干湿交替处理下出现变化的代谢产物进行功能分 析。结果表明干湿交替处理下，有19个代谢物的含量上调表达，其中脯氨酸、甘氨酸、丝氨酸、己烷等参与氨 基酸代谢途径，景天庚酮糖参与光合作用，2-羟基-1，2，3-丙三羧酸钙参与TCA循环，肌醇参与半乳糖代谢，丁 烷参与糖酵解途径等。可见，干湿交替处理增强了氨基酸和能量代谢等途径中关键酶的活性，促进了物质与能 量的代谢。此外，本研究还通过TMT（同位素相对标记与绝对定量技术）与LC-MS分析相结合的方法，对于 湿交替处理下籽粒总蛋白进行相对定量分析，共鉴定到13个蛋白点出现显著差异表达，其中5个蛋白点上调表 达，8个蛋白点下调表达。通过对差异蛋白功能的鉴定分析发现，干湿交替处理能够促进籽粒灌浆过程中的抗逆 响应、蛋白合成、淀粉合成、氨基酸及能量代谢、物质转运与储存等生化过程。本研究应用相对定量代谢与蛋 白组学明确了大穗型水稻籽粒灌浆对水分干湿交替处理的响应机制，为进一步揭示水稻籽粒灌浆调控机制提供 理论依据。 关键词：水稻;籽粒灌浆；干湿交替；蛋白；代谢物 Thequantitativemetabolomicsandproteomicsanalysisofalternate drying-wettingtreatmentduringgrainfillininrice Abstract:Theeffectofdry-wetalternatewatertreatmentongrainfillingwasinvestigatedwiththelargepaniclerice Jin-hui809asmaterial,designedtorevealthericegrainfillingperiodofalternatedrying-wettingbiologicalprocesses. Inthestudy,therelativequantitativeanalysisofgrainmetabolitewasproceededbyGC-MSfirstly.Andthenthe Heat-map,PCA,SAM,oplsdaandmet-padataanalysismethodswereusedtoanalysisthefunctionofdifferent expressedmetabolitesduringthericegrainfillingprocessunderalternatedryingandwettingtreatment.Theresults showedthat19metaboliteswereup-regulatedunderalternatedryingandwettingtreatment,inwhichProline,glycine, serine,hexane,etc.,involvedintheaminoacidsmetabolism,Sedoheptuloseinvolvedinphotosynthesis, 1,2,3-PropanetricarboxylicacidinvolvedintheTCAcycle,Inositolinvolvedingalactosemetabolism,butaneinvolved intheglycolyticpathway.Itwasdemonstratedthatthekeyenzymeactivitiesofaminoacidandenergymetabolism pathwayswereenhancedunderthealternatewettinganddryingtreatment,promotingthematerialandenergy metabolism.Inaddition,relativequantitativeanalysisofgraintotalproteinunderthetreatmentwasconductedbyTMT andLC/MS.Therewere13expressedsignificantlydifferentlyproteinspotsbe