菌种生产技术规程.docVIP

DB21 辽宁省地方标准 （ 辽宁省质量技术监督局发布） DB21/T1730—2009 北虫草菌种生产技术规程 范围 本标准规定了北虫草菌种定义，制作要求，质量要求，标志及储存要求。 本标准适用于北虫草菌种生产。 规范性引用文件 GB/T191-2008 外包装储运图示标志 GB/T6388-1986 运输包装收发货标志 NY/T528-2002 食用菌菌种生产技术规程 《食用菌菌种管理办法》 （中华人民共和国农业部第62号令发布） 定义 本标准采用下列术语和定义 北虫草菌种 北虫草生物学分类地位属于子囊菌纲，肉座菌目，麦角菌科，虫草属，蛹虫草。它是以中国北方野生蛹虫草为样本，采用组织或孢子分离法，经分离、纯化、驯化，选育获得的具有一致性、稳定性、结实性的真菌菌种，经人工培养进一步扩大繁殖以及用于栽培生产的纯菌丝培养物，包括固体母种和液体生产种。 固体母种 北虫草菌种的纯菌丝固体培养物及其继代固体培养物，以玻璃试管为培养容器和使用单位，又称一级菌种、试管菌种。 液体生产种 由固体母种接种于液体培养基扩繁而来的纯菌丝液体培养物，培养容器为玻璃瓶或发酵罐，只用于生产不能用于菌种扩繁。 制作要求 技术人员 具有生产北虫草菌种的专业技术人员。 环境要求 环境卫生 场地要求远离禽畜设施，垃圾场，无污水和其他污染源，通风，透光，地面及四周无灰尘，无虫害等。 设置和布局 按NY/T528中的4.3规定执行（截选） 应按菌种生产工艺合理安排布局。 灭菌室 要求水电安装方便，通风良好，空间充足，散热畅通。 冷却室 洁净，防尘，易散热。 接种室 要设缓冲间，防尘换气性能好，内壁和屋顶光滑，便于清洗和消毒，做到空气清新。 培养室和储存室 内壁和屋顶光滑，便于清洗和消毒。培养室和储存室墙壁要加厚，利于控温。 菌种实验室 水电方便，利于装备相应的检验设备和仪器。 设备设施 按NY/T528中的4.4规定执行（截选） 基本设备 磅称、天平、高压灭菌锅或常压灭菌锅、净化工作台、接种箱、调温设备、除湿机、培养架、恒温箱、冰箱、显微镜等常规用具，产量大的菌种厂还应配备搅拌机、装瓶装袋机。高压灭菌锅应使用经有关部门检验的安全产品。 基本设施 配料、分装、灭菌、冷却、接种、培养等各环节的设施规模要配套。冷却室、接种室、培养室和储存室都要有调温设施。 菌种生产工艺流程 流程顺序 培养基配制 → 分装 → 灭菌 → 冷却 → 接种 → 培养 → 检查 → 成品 培养原料 用马铃薯、玉米粉、蚕蛹粉、大豆粉、豆粕粉、葡萄糖、蛋白胨、酵母膏（粉）、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂、维生素B1等为原料，经配制后作为北虫草的营养基质。其中，玉米粉、蚕蛹粉、大豆粉、豆粕粉为市售产品，要求无结块无变质；马铃薯出芽变绿的不能使用；蛋白胨、酵母膏（粉）为生化试剂；葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、为化学纯以上级试剂；琼脂、维生素B1为食品级以上产品；水为自来水等可饮用水。 培养容器 固体母种生产容器 使用玻璃试管和胶塞，试管规格为18×180mm或20×200mm，试管塞一般采用胶塞，保存时间短直接用于液体生产种的可以使用棉塞，不能使用脱脂棉做试管塞。 液体母种生产容器 使用250ml、500ml玻璃输液瓶，用聚丙烯薄膜和乳胶圈封口。 培养基配制与分装 固体母种培养基配制与分装 固体母种培养基配方 马铃薯200g，葡萄糖20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，维生素B1 10 mg，琼脂20 g，水1000ml，PH6.0-7.0。 葡萄糖100 g，蛋白胨10g，酵母膏1g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，琼脂20 g，水1000ml，PH6.0-7.0。 固体母种培养基配制与分装 按配方称好各种原料，将马铃薯洗净去皮去芽眼，切成3-5mm薄片，加水1000ml，文火煮沸20-30分钟，搅拌溶解后，加开水补足至1000ml，趁热分装试管，装量为试管的1/4-1/5，塞入胶塞。 液体生产种培养基配制与分装 液体生产种培养基配方 马铃薯200g，蚕蛹粉10g，葡萄糖20 g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，维生素B1 50 mg，水1000ml，PH6.0-7.0。 葡萄糖100 g，蛋白胨10g，酵母膏1g，磷酸二氢钾3 g，硫酸镁1.5 g，琼脂20 g，水1000ml，PH6.0-7.0。 液体生产种培养基配制与分装 按配方称好各种原料，将马铃薯去皮去芽眼，称取200g，切成3-5mm