纳升电喷雾串联质谱在修饰多肽及未知多肽结构分析中的应用.pdfVIP

一 l968一 药物分析杂志ChinJPharmAnal2008，28(11) 纳升电喷雾 串联质谱在修饰多肽及未知多肽结构分析 中的应用 李萍，王红霞，刘炳玉，王鸿丽，王悦，刘锋，魏开华 (国家生物医学分析中心 ，北京 100850) 摘要 目的：以2种多肽为例，说明纳升电喷雾串联质谱存修饰多肽及未知多肽结构一级结构确证和分析中的应用。方法：存 纳升电喷雾串联质谱TOFMS模式下对2种多肽的分子量进行了确认，然后在 MS／MS模式下获得双电倚肽段的碎片离子峰。 结果：曲谱瑞林一级结构全序列是E’HWSYWLRPG’，其中N一端焦谷氨酸和C一端甘氨酰胺。未知多肽通过 “序列拼接法”得 到该样品的全序列T’VSPvwLPPsvY，其中第4位脯氨酸加合了一个钠离子，且N一端苏氨酸磷酸化。结论：本研究表明纳 升电喷雾串联质谱在分析修饰多肽及未知多肽方面具有明显优势。 关键词：纳升电喷雾串联质谱；多肽；磷酸化修饰 ；c端序列 中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：0254—1793l2008)11—1768～04 Applicationsofnan0electlospraytandem massspectrometry in structureanalysisofmodifiedandunknownpeptides LIPing，WANG Hong—Xia，LIU Bing—Yu，WANG Hong—Li，WANGYue，LIU Feng，WEIKai—Hua (NationalCenterofBiomedicalAnalysis，Beijing100850，China) Abstract 0bjective：Theapplicationofnanoelectrospraytandemmassspectrometryincharacterizeandanalysisof theprimary structureofmodifiedandunknownpolypeptides．isexpleinedbyexampleof2polypeptides．M ethods： ThemolecularweightsoftwopeptidesweredeterminedinTOFMSmode．Thenfragmentationionsof[M+2H]“ ionextractedfrom thenanoelectrospraytandem massspectrometry(MS／MS)weresubsequentlyobtained．Results： Theprimary structureoftriptorelinisdeterminedtobeE’HWSYWLRPG’，ofwhichtheN—terminalispyroglutamic acid(E’)andtheC—termianlisglycinamide(G’)．Theprimarysturctureofunknownpeptidewasidentifiedtobe T’VSP VWLPPSVYbysequencedockingmethod，ofwhichtheN—terminalofthepeptide，threonine(T’)wasphos- phorylatedandtheproline(fouthposition)isconjugatedwithsodiumion(P )．Conclution：Thedatasuggested thatelectrospraytandem massspectrometry techniquehaveobviousadvantageinanalyzingthefullsequenceofrood— ifiedorunknownpeptides． Keywords：Nano—ESI—MS—MS；peptide；phosphorylatedmodification；C～terminalsequencing 随着生物技术的发展，许多合成多肽药物的N ic公司)；色谱纯甲酸(美国Acros公司)。实验用水 一 端或C一端或两端进行了修饰，以提高其药效、延 为Milli～Q纯水器制备的去离子水 。曲普瑞林 (厂 缓半衰期或降低副反应，这给多肽药物