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松墨天牛肌钙蛋白T基因全长cDNA克隆及分析.pdf
福建农林大学学报 (自然科学版) 第44卷第 1期
JournalofFujianAgricultureandForestryUniversity(NaturalScienceEdition) 2015年 1月
松墨天牛肌钙蛋白T基因全长 cDNA克隆及分析
吴华俊，许 雯，林 同
(华南农业大学林学院，广东广州 510642)
摘要：采用 cDNA末端快速扩增 (RACE)方法获得 了松墨天牛 (Monocham~ 口fm )肌钙蛋白T基因eDNA，全长 1531
bp，命名为MaTnT(GenBank：KJ756400)．该基因开放阅读框 (OaF)为 1020bp，编码339个氨基酸，等电点为9．26，推测的编
码蛋白质分子质量为37．29ku．同源比对结果表明：MaTnT与褐飞虱 (Na／w~ alugens)、黑腹果蝇 (Drosophilamealno-
gaster)等 12种昆虫肌钙蛋白氨基酸同源性为87％一88％；构建的系统发育树显示 MaTnT处于独立分支；MaTnT没有信号
肽和跨膜螺旋，属于亲水性氨基酸，二级结构包含了螺旋和不规则卷曲两种形式，含有丝氨酸(Set)、苏氨酸(The)、酪氨酸
(I )磷酸化位点数分别为8、9．3个．RT—qPCR检测表明，MaTnT基 因在幼虫、蛹和成虫中均有表达；在成虫触角和足中表
达量最高．
关键词：松墨天牛；肌钙蛋白；基因克隆；RT—qPCR
中图分类号：Q966 文献标识码：A 文章编号：1671~470(2015)01-0058-06
Cloningandcharacterizationoffull-lengthcDNA sequenceoftroponin
T genefrom Monochamusalternatus
WUHua-jun，XUWen，LINTong
(CoHegeofForestry，SouthChinaAgriculturalUniversiyt，Guangzhou，Guangdong510642，China)
Abstract：AfulllengtIlsequencetroponinTgenewasclonedfromMonochamusalternatusbyRACE(rapid-amplificationofcDNA
ends)method，designatedasMaTnT(GenBank：KJ756400)．Thefull—lengthcDNAofMaTnTWas 1531bp，whichcontmnod a
1020bpopenreadingfrmae(ORF)encoding339amino d8withacalculatedmolecularmassof37．29kuandanisoelectricpoint
0f9．26．Bioinformaticnaalysisshowedthat theMaTnTproteinWas hydrophilic．withouthtesingalpeptideandtransmembranehell-
ees；nadhadhJshaminoacidsequencehomologywihthtetroponinsin12insectssuch鹊 lugensandDrosophilamealno-
gaster(87％一88％)．PhylogenetictreeindicatedMaTnTWaS inallindependentbrnach．Thesecondarystructurepredicationof
MaTnTwas comprisedofhelixesnadcoils．Th ere were 8，9nad3 serine，threoninenadp-hydroxyphenylalaninephosphorylation
sites，respectivelyamongMaTnT．RT—qPCR detcetionshowedthatMaTnT geneWas expressed inlarvae，pupaeandadults，nad
reachedthehisheat exp
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