香蕉水通道蛋白基因在成熟果实中的表达分析与亚细胞定位研究.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiA ．Sci．2008，36(30)：13118—13120 责任编辑 张杨林 责任校对 傅真治 香蕉水通道蛋白基因在成熟果实中的表达分析与亚细胞定位研究 谢学立，刘菊华，徐碧玉，金志强 (中国热带农业科学院生物技术研究所热，海南海口57】1o1) 摘要 [目的]更好 了解香蕉果实成熟与水分代谢的关系。[方法]用RT—PCR的方法探讨水通道蛋白基 因MaPIP1；1在香蕉果实成熟过 程 中的表达情况，并fi-0用绿色荧光融合蛋白研究MaHP1；l的亚细胞定位。[结果]香蕉水通道蛋白基因MaPIP1；1在正常和诱导成熟的 果实中，表达持续下降。在高锰酸钾处理的果实中，MaPIP1；1在果实呼吸跃变发生之前表达平稳。亚细胞定位结果表明，MaPIP1；1主 要定位于细胞质膜上。 结论1推测MaHP1；1基因在香蕉果实中可能起 了运输水分或其他小分子物质的作用。 关键词 香蕉；水通道蛋白；半定量PCR；绿色荧光蛋白 中图分类号 Q945．65 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2OO8)3o一13118—03 ResearchontheExpressionofBananaAquaporinGeneinRipeFruitandSub-cellularLocalization 皿 Xue．1ietal (BiotechnologyResearchInstitute，ChinaAcademyofTropicalAgriculturalSciences，Haikou，Hainan57l101j Ak~traet IObjectiveI3lierelationshipbetweenb~anafruitmaturityandwatermetaholismwasbetterunderstood．1MethodjR_r_PcRmehtodwasusedto researchhteexpressionofaquaperingeneMaPIPI：1inn】eprocessofbnaanafruitmaanityandhteMaPIP1；1sub-cellularwaslocatde wihtthegTeenflu— oreseentproteinfusion．[Results]Theexpressionofbananaaquaporingene蚴lP 1；1wasgraduallyrdeucedinnomlal／niduedeprocessofnkatttrefruit．In htefruitstreatedwithpotassiumpermanganate，theMaPIPI；lshowedasmoohtexpressionbeforerespiratory—jumping．Sub-cellulralocalizationshowedhte MaHP1；1WaSmainlypositdeonthecytoplasmicmetr~brnae．[Conclusionj111e HPl；lgeneinbananafruitnw playawatertransportorohtersmall moleeulcs． Keywords Banana；Aquaporin：SIen1i．quantitativePCR；Greenfluorescentpmtein 水通道蛋白(Aquaparin)被认为是细胞水泵。自从 Preston PCR。PCR扩增条件如下：94℃预变性 1min，94℃变性30S， 等_】在 1991年成功克隆第一个 AQP分子以来，人们克隆了 56℃退火30S，72oC延伸30s，扩增 30个循环后，72℃延伸6 一 些来源于果实的A s基因，如番茄[I3]、葡萄l、梨l和 min。RT-PCR产物经 2％琼脂糖 电泳后 ，照相。重复4次，使 苹果_6j等。但水通道蛋 白基 因与果实成熟 的关系还所知甚 结果一致。 少。香蕉是世界上最重要的作物之一。最近 ，笔者从香蕉果 1．2．3 构建植物表达载体及亚细胞定位。根据 MaPIP1；1 实中克隆到了一个水通道蛋白全长基因MaPIP1；1J。现研 序列 J设计引物，3，5引物 的末端部分分别加上 NcoI、smI 究MaPIP1；1基因在香蕉果实成熟时的表达情况，以及