小鼠孤雌胚、体外培养胚与体内胚H3K9乙酰化模式的比较.pdfVIP

遗 Hereditas(Beijing)2015年1月，37(1)：77--83 WWW．chinagene．cn 研究报告 小鼠孤雌胚、体外培养胚与体内胚H3K9乙酰化 模式的比较 陈利 ，丁芳 ，刘勇2，一，吴风瑞 2，一，丁彪 2，一，王荣2，李文雍2 1．安徽大学生命科学学院，合肥 230039； 2．胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室，阜阳 236041； 3．阜阳师范学院生物与食品工程学院，阜阳 236041 摘要：孤雌胚胎的发育率比体内体外生成胚胎的发育率要慢，为研究小鼠孤雌胚、体外培养胚 H3K9乙酰化 fH3K9ac)模式与体 内自然胚之间的差异、曲古抑菌素A(Trichostatin，TSA)对孤雌胚 H3K9乙酰化模式的影响 及表观遗传模式对孤雌胚、体外培养胚发育的影响，文章采用间接免疫荧光法对小鼠植入前各时期孤雌胚、体 外培养胚及体 内自然胚基因组组蛋白的H3K9乙酰化水平进行检测。结果显示，植入前各时期孤雌胚H3K9乙 酰化模式与体 内组变化趋势基本一致，但平均荧光强度较体 内组普遍偏高；经 TSA处理后孤雌胚 H3K9乙酰 化水平有所提高，原核期至8．细胞期差异显著(P0．05)。体外培养胚 H3K9乙酰化荧光强度与体 内组变化趋势 也基本一致，但平均荧光强度较体内组普遍偏低 。以上结果表明，小鼠孤雌胚 H3K9乙酰化水平高于体 内胚， 使植入前胚胎发育过程中本应沉默的基 因启动子发生超 乙酰化，进而抑制胚胎发育，这可能是造成孤雌胚胎发 育能力较差的重要原因之一；TSA处理可 以部分弥补体外培养环境对胚胎发育带来的伤害，但 TSA提高孤雌 胚的发育能力可能并不完全是通过改变H3K9乙酰化水平来实现的。 关键词：表观遗传修饰；孤雌胚胎；H3K9乙酰化；曲古抑菌素A；小鼠 ComparativeanalysisofH3K9aeetylationlevelinparthen0genetic， and ／nvitroand／nvivodevelopedmouseembryos LiChen ，FangDing，YongLiu ，FengruiWu ，BiaoDing ，RongW ang ，WenyongLi 』．CollegeOfLifeScience,AnhuiUniversi Hefei230039，China； 2．KeyLaboratoryofEmbryoDevelopmentandReproductiveRegulationofAnhuiProvince，Fuyang236041，China； 3．CollegeofLireScience,FuyangNormalUniversity,Fuyang236041，China Abstract：Thedevelopmentalrateofparthenogeneticembryosisslowerthanthatofembryosgeneratedinvitro andinvivo．Todetecttheeffectsofepigeneticmodificationonembryodevelopment，wecomparedtheH3K9acetyla— tionlevelinthesethreetypesofembryosaswellasparthenogeneticembryostreatedwith ahistonedeacetylasein- 收稿 日期：2014--06--18；修回 日期：2014-10--01 基金项 目：国家 自然科学基金项 目(编号31201789)，安徽省省级学科建设重大项 目(编号：皖教秘科[2014128号)，安徽大学学术创新 研究项 目(编号：yqhl00130)，安徽省教育厅 自然科学基金项tl(编号：KJ2013A202)和安徽省 自然科学基金项 目(编号：1408085MC44， 1408085QC65)资助 作者简介 ：陈利，硕士研究生，专业方 向：发育分子生物学。E—mail：chenli3096@163．tom 通讯作者：李文雍 ，教授 ，硕士生导师，研究方 向：胚胎发育分子生物学。E—mail：liwenyong@aliyun．tom DOI：10．162888．yczz．2015．01．O11 网络出版时间：2014．11．24 17：57：46 URL：http：／／www．cnki．net／kcms／detail／11．1913．R．2