小鼠眼球标本石蜡切片制作方法的改进.pdfVIP

36 JournalofHenanUniversity (MedicalScience) Mar． 2015 Vo1．34 No．1 小鼠眼球标本石蜡切片制作方法的改进 孙 自强，王 军，陈明亮，程会军，张 磊，李 慧，吉爱玲 ，李彦章 (河南大学 医学院，河南 开封 475004) 摘 要 ：目的 探讨小鼠眼球标本石蜡切片的制作方法。方法 处死 C57BL／6小 鼠，取 眼球 固定于质量分数为 4 中性 多聚甲醛中，通过严格控制脱水与浸蜡程序并制成石蜡切片，经 HE染色后在显微镜下观察 。结果 眼球 外形均无 明显变形和收缩 ；显微镜下视 网膜组织结构完整清晰 ，各层细胞排列紧密，无 明显裂隙 。结论 该方法适 合小鼠眼球标本切片，尤其是视 网膜切片的一种有效制作方法。 关键词 ：小鼠；眼球 ；固定液 ；HE染色 中图分类号 ：R322．91 文献标识码 ：A 文章编号 ：1672—7606(2015)01 0036—04 Improvedmethodforparaffinsectionsofmouseeyeball SUN Ziqiang，WANGJun，CHEN Mingliang，CHENG Huijun，ZHANG Lei，LIHui，JIAil ing，LIYanzhang (MedicalcollegeofHenanUniversity，Kaireng，Henan475004，China) Abstract：0bjective TodetermineoptimalHEstainingproceduresonparaffinsectionsofmiceeyebal1．Methods TheC57BL／6micewerekilledbyusingCO2．Theeyeballsofthemiceweretakenandimmersedinto4 neutral paraformaldehyde (PFA)solution．Thefixedeyeballsweredehydratedandembeddedinparaffin．TheeyebaIlswere cutto5um thicknesssections．AfterHE staining，thesectionswereobservedunderalightmicroscope．Results Therewasnoobviouseyebal1distortionorretina1detachment．ThestructureofretinaItheeyeballswasclearand intact．Thecellsinretinalwerearrangedregularlyandcompactly．Conclusion Theimprovedmethodforparaffin sectionsiSmoreeffectivethanothersandfittODaraffinsectionsofmouseeyebal1． Keywords：mouse；eyeball；fixativesolution；HEStaining 眼球是一个构造精细复杂的球形体 ，眼球 内各种 各层组织由于收缩率的不同，采用常规脱水和透明的 组织软硬度相差悬殊。巩膜为致密结缔组织 ，视网膜 方法容易使视网膜严重收缩而脱离 ，严重影响切片的 柔软容易脱落 ，晶体很坚硬 ，玻璃体为胶状物。由于 完整性，对组织学观察造成影 响，进而对眼科病理学 各部分的结构微细，各层次之间连接性很差 ，故在制 研究造成很大影响 。目前 ，国内外已有制作全眼球病 作石蜡切片时较一般组织困难_ll。]：①固定液很难渗 理切片的特殊方法 ，但仍存在制片周期长、材料要求 透到组织各层 ，尤其是不易渗人质地坚韧 的巩膜 ，造 特殊 、购置困难 、成本高以及部分方法所用试剂毒性 成眼球 内各结构分离的现象 ；②眼球标本不像其他组 较大等缺点，不能适应实际需要_l7]。为克服现有方 织标本新鲜时可切开固定，需要整个眼球 固定 引；③ 法的不足 ，我们在常规方法基础上进行技术改进 ，获 收稿 日期 ：2014121O 基金项 目：国家 自然科学基金；河南省科技厅科技发展计划项 目(132300410012)；河南省教育厅科学技术研究 重点项 目(14A3