体外大鼠成骨细胞对破骨细胞形成的影响.pdfVIP

维普资讯 第29卷第3期 西 安 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) Vo1．29NO．3 2008年 6月 JournalofXi’anJiaotongUniversity(MedicalSciences) Jun．2008 体外大鼠成骨细胞对破骨细胞形成的影响 刘文佳 ，王晓庚 ，周 洪 ，李 昂。 (西安交通大学医学院附属 口腔医院：1．正畸科 ；2．医学研究中心，陕西西安 710004) 摘要 ：目的 通过将 鼠成骨细胞与破骨细胞直接共培养 的实验方法 ，研究成骨细胞对破骨细胞分化及功能成熟的影 响。方法 按照 M—CSF30 g／L、RANKL50p_g／L的浓度对 鼠骨髓单个核细胞诱导培养 6d，与原代培养 3d的鼠成 骨细胞按细胞数量 1：1直接共培养 ，加入 1，25一(OH)D 1×10 mol／L和 PGE 1×10一mol／L，利用形态学观察、 TRAP染色、骨吸收陷窝检测等方法对共培养细胞进行鉴定 。结呆 成骨细胞与破骨细胞共培养时，成骨细胞有明显 的生长优势 ；染色后显微镜下可见大量呈单层排列的成骨细胞 ，偶见 TRAP(+)的破骨细胞 。结论 成骨细胞对破骨 细胞分化及功能成熟 的影 响与两者 的相对数量有关 。本实验中，由于成骨细胞快速生长 ，当其数量 多于破骨细胞 时 ， 可能使 1，25一(0H)D 对成骨细胞 RANKL表达 的上调作用不足，且 PGE 对成骨细胞 OPG表达的下调作用不足， 从而主要表现为对破骨细胞形成及分化 的抑制作用 。 关键词 ：破骨细胞 ；成骨细胞 ；细胞培养 ；RANKL；M—CSF 中图分类号 ：R783．5 文献标识码 ：A 文章编号 ：1671—8259(2008)03—0281-04 Effectsofosteoblastsontheformationofosteoclastsinvitro LiuW enjia，W angXiaogeng ，ZhouHong ，LiAng (1．DepartmentofOrthodontics，theAffiliatedStomatologicalHosptial， MedicalSchoolofXi’anJiaotongUniversity；2．MedicalResearchCenter， MedicalSchoolofXi’anJiaotongUniversity，Xi’an710004，China) ABSTRACT：Objective Byculturingtheosteoclaststogetherwiththeosteoblastsdirectlytoinvestigatethe effectofosteoblastsontheformationofmatureosteoclasts．Methods Thebonemarrowmon0nuclearcellsofrats weretreatedwith 30t~g／LM-CSF and 5Op-g／L RANKL and cultured for6days．Subsequently，theprimary osteoblastswhichwereofthesamequantityastheosteoclastswereCO-cultureddirectly．IntheCO-culturesystem ，we addedthe liquid containing 1，25-(OH)2D31× 10 mol／L andPGEz1× 10～ mol／L．Themorphological observation，TRAPstainingandpitstainingwereadoptedtoidentifyosteoclasts．R