提异黄酮前后豆粕中大豆凝集素最佳干热灭活方法的研究.pdfVIP

《品斟工业》·2008年啊29簋麓22期 垠 赏酮獭 毒 墓 爿 中 豆凝希嗉 一 最 壤 于 热 嚣 活 方 渗 蛳 ≈ 王忠艳 摘 要 利用二因子析因试验设计，系统地研究了通过不同的干热温度和不同的处理时间对提异 黄酮前后豆粕中大豆凝集素活力和蛋白质溶解度影响，通过系列试验得出结论：对普通豆粕经过干热 130℃20rain、25rain或 140oC5rain，对提异黄酮豆粕 130℃干热 10rain，不但可使凝集素活力达到最 低，而且可使动物对豆粕中蛋白质利用率最高，如果在实际中应用可以广泛地提高豆粕的有效利用率。 关键词 豆粕；提异黄酮豆粕；大豆凝集素；蛋 白质溶解度 中图分类号 $816．9 大豆凝集素 (soybeanagglutinin．SBA)是大豆中 1．2 试验设计与试验处理 含量较高的生物活性蛋 白，约 占大豆蛋 白质总量的 干热处理时间分别设为5、10、15、20、25min5个 10％，它对豆科植物与固氮菌之间的共生起着重要的 梯度 ，温度设为90、100、110、120、130、140℃6个梯 作用，是一种糖原蛋白质，分子量为 120kDa，其组成为 度 ，采用二因子有重复的试验设计 。在温度和时间形 由4个略有不同的亚基组成，每个亚基的分子量约为 成的30个处理中，每一个处理设 4个重复。将称量好 30kDa，有一个结合糖位点．4个亚基 中每个亚基都含 的干样品放入烘干箱内，温度达到处理温度后开始计 有 1条含 9个甘露糖 的寡糖链[·并各 自含有一个紧 时，时间结束后取出，凉后密封保存于冰箱中待用。 密结合的Ca和Mn+(DeBoedck等，1984)。大量研究 1．3 凝集素活力的测定方法 证实 ：凝集素通过架桥作用可导致动物和人的血球凝 红血球制备：取兔血液按每 1Inl加 3滴 0．44％柠 聚翻；同时大豆中的凝集素可对动物肠壁、刷状缘酶活 檬酸钠以破坏血液中纤维蛋白原 ，用高出血球 2～3倍 性、小肠粘膜细胞代谢 、肠道细菌生态物质代谢及免 的0．85％生理盐水洗涤 3次 ，分别离心3次。倾去上 疫机能产生一定的影响口】。另外SBA能与肠上皮细胞 清液 ，配成 2．5％的红细胞悬液。置4℃冰箱中保存．1 结合 ，从而降低动物对营养物质的吸收利用 ．并破坏 周之内有效 ，若摇起来混浊则不能再用。 小肠上皮细胞的正常代谢，促进肠道和胰腺代偿性增 凝集素活力测定 ：．准确称取 lg粉碎样品用 8Tnl 生，耗费过量的蛋白质和能量，增加体 内分解代谢释 石油醚 (沸程 30—60℃)室温下抽提 8h。过滤后脱脂 放多胺 ，造成内源氮排出增加 ，破坏动物的消化器官、 试样与PBS (0．02mol／1磷酸缓冲液一0．15mol，lNaC1． 降低动物对营养物质的利用率，并引发腹泻等病理变 pH值 7．4)以 1：8比例 (wni)抽提 8h，4000r／min 化，抑制动物生长4[1。本研究的主要 目的就是探讨提取 离心 10min后上清液用 PBS定容至 10．Oml，在微量 异黄酮前后豆粕中凝集素活性变化情况及在不破坏 V型血凝板上进行活力测定圈。以产生50％血凝作用 豆粕中蛋白质前提下的最佳干热灭活方法 ，为豆粕的 试样 的最大稀释度为试样的SBA凝集效价即活力单 合理利用提供最佳参数值。 位 (hemagglutinationunit，HU)，并 以初始 SBA 活力为 1 试验材料和方法 100作对照。 1．1 试验材料的采集 1．4 蛋白质溶解度测定方法 生豆粕及提异黄酮豆粕经粉碎过 100目筛 ，用于 蛋白质溶解度用0．2％氢氧化钾溶解方法进行测 分析凝集素活力和蛋白质溶解度．实际分析在东北林 定[61。 业大学营养实验室进行。 1．5 试验数据处理方法