厄贝沙坦对高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子与膜型基质金属蛋白酶1表达的影响.pdfVIP

Bulletin 2009 ·531· 中国药理学通报ChinesePharnmcolo#cclApr；2$(4)：531—5 厄贝沙坦对高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞 结缔组织生长因子及膜型基质金属蛋白酶一1表达的影响 姚芳，闫吉吉，史永红，郝军，段惠军 (河北医科大学病理学教研室，河北石家庄050017) 322．61；R342．22；R345．63； 中国图书分类号：R-332；R 种原因所致终末期肾病进展中起着关键作用。近年 977．3 R692．390．22：R692．390．53；R 来越来越多的实验提示结缔组织生长因子(CTGF) 文献标识码：A文章编号：1001—1978(2009)04—0531一05 是TGF—p发挥致硬化作用的重要的下游介质。体 摘要：目的研究血管紧张索Ⅱ受体1拮抗剂厄贝沙坦对高 内外实验显示，CTGF可能参与介导血管紧张素Ⅱ 糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)和 (AngII)在血管疾病中的致纤维化作用…。目前 膜型基质金属蛋白酶一1(MTl一MMP)表达的影响。方法体 外培养的大鼠肾小球系膜细胞，分别给予高糖和厄贝沙坦干 互间的作用的深入研究，而关于血管紧张素Ⅱ受体 blot法分别检测CTGF和MTl- 预。采用RT．PCR及Western MMP的mRNA及蛋白的表达，用酶联免疫吸附法(ELISA) 检测培养上清中Ⅳ型胶原的含量。结果与对照组相比，高 影响尚未见相关报道。本实验旨在通过体外培养的 糖组各时间点系膜细胞CTGF表达明显上调，Ⅳ型胶原的分 大鼠肾小球系膜细胞，观察血管紧张素Ⅱ受体1拮 泌增加，且二者随时间持续增高；而MTI—MMP的表达则随 抗剂厄贝沙坦对高糖培养的系膜细胞CTGF、MTI． 时间呈明显下降趋势。厄贝沙坦能够抑制高糖引起的上述 MMP及细胞外基质蛋白表达的影响，以探讨厄贝沙 变化。结论高糖可诱导肾小球系膜细胞CTGF表达增加， 坦肾脏保护作用的可能机制。 抑制M3’1．MMP的表达。厄贝沙坦抑制肾小球系膜细胞基 1材料与方法 质分泌的作用可能部分通过抑制CTGF，增加MTI-MMP的 1．1材料厄贝沙坦(粉剂)由浙江华海药业有限 表达而实现。 公司馈赠。大鼠HBZY—l肾小球系膜细胞株购自武 关键词：厄贝沙坦；肾小球系膜细胞；结缔组织生长因子；膜 汉大学保藏中心。羊抗大鼠CTGF多克隆抗体、羊 型基质金属蛋白酶 隆抗体，ECL增强化学发光试剂盒为SantaCruz公 肾小球系膜细胞外基质(extracellularmatrix， ECM)合成增多和(或)降解减少所致ECM异常堆型胶原ELISA试剂盒为Sigma公司产品。辣根酶标 积在糖尿病肾病(diabeticnephmpathy，DN)的肾小记兔抗羊IgG和羊抗兔IgG由北京中杉公司进口分 球硬化发生、发展中具有重要作用。研究发现基质 1．2方法 金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases，MMPs)是负 责ECM降解的主要酶系。以往有关DN中MMPs1．2．1细胞培养与分组常规方法复苏肾小球系