DBS对海人酸致痫大鼠突触外GABAA受体α5亚基影响.pdfVIP

第三届中国神经调控大会 3rd SofChineseNeuromodulation Congres Society 神经外科 DBS对海人酸致痫大鼠突触外GABAA受体 a5亚基的影响 孙涛1 申法政l 王峰1 齐江华2 宁夏医科大学总医院神经外科， 宁夏银川市胜利南街804号， 甘肃省肿瘤医院神经外科 【摘要】 目的：研究脑深部电刺激(DBS)对海人酸致痫大鼠突触外GABAA受体Q5亚基的影响，探 讨DBS可能的治疗机制。 行为学、实时荧光定量PCR和Westenblot，分析突触外GABAA受体Q5亚基表达变化情况， 及其与DBS治疗癫痫疗效之间的关系。 (2．50±0．93)、 PCR检测显示癫痫组、丘脑底核DBS组及海马DBS组Q (0．62±0．07)、 (0．79±0．05)；Westenblot显示癫痫组、丘脑底核DBS组及海马DBS 组Ct 5亚基蛋白表达分别为(0．1l±0．03)、(0．36±0．05)、(0．44±0．04)。通过分析 显示癫痫组与DBS治疗组之间Q 且丘脑底核DBS组与海马DBS组比较差异有显著意义(P0．01)。 结论：DBS可以有效抑制癫痫发作，可能与Q5亚基的表达水平密切相关；海马DBS似乎比 丘脑底核DBS更有效。 【关键词】癫痫；DBS；丘脑底核；海马；GABAA受体；亚基 抗痫药物及癫痫手术是目前治疗癫痫的主要方法，但仍有一部分患者难以有效控制[1]。 brain 近期研究表明：脑深部电刺激(deep 性，从而达到控制癫痫发作[2，3]，并逐步应用于临床。其中治疗靶点的选择一直存在争论。 尚不清楚DBS确切的治疗机制。 大量研究表明GABA和GABAA受体介导的抑制系统障碍对癫痫的发生和发展起到重要作 用。大部分研究主要集中于突触GABAA受体及其所介导的相位性抑制与癫痫的关系，但仍 有许多问题难以说明。近年来，另外一种持续性突触外GABA紧张性抑制逐渐引起人们极大 的兴趣[4]。越来越多的研究证实这种持续的紧张性抑制对神经元的功能状态起到极其重要 的作用[5]。其中含有a 5亚基的突触外GABAA受体在海马中间神经元紧张性抑制中起到主 要作用[6]。本实验应用行为学、实时荧光定量PCR及Westernblot等技术，观察大鼠行 为学变化，检测海马组织突触外GABAA受体Cl 5亚基mRNA及蛋白表达情况，研究DBS对致 痫大鼠突触外GABAA受体Q 5亚基表达的影响，探讨DBS可能的治疗机制。 材料与方法 1．材料：海人酸购于Sigma公司；Cl5亚基引物序列：上游引物：5GCTCT GGATGTGTATTTCTGGA3 7， 下游引物：5CCTGTAGTCAGCATTGAAGTGG3 ， 扩增90bpDNA 片段； 内参13肌动蛋白，上游引物：5’CCCATCTATGAGGGTTACGC3 7， 下游引物： 5’TTTAATGTCACGCACGATTTC3 GABAA受体Q 兔lgG购于ZSGB-BIO公司。 78 第三届中国神经调控大会 3rd ofChineseNeuromodulation Congress Society 2．实验动物及分组：6～8周龄雄性sD大鼠24只(宁夏医科大学动物实验中心提供)， 体重250～3009，单笼饲养，昼夜循环12／12 丘脑底核DBS组：电极植于海人酸致痫大鼠左侧丘脑底核。