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1 ANIMALBIOTECHNOLOGYBULLETIN
2012，VOLUMEl3，NO
家猪13／17罗伯逊易位中端粒的研究
迟晓瑶，蒋亚军，刘剑飞，孙静，曹月胜，孙金海’
(青岛农业大学动物科技学院，山东青岛266109)
引言
端粒是存在’j+线状染色体末端的DNA重复序列．对13／17罗伯逊易位染色体端粒的研
究可以为研究罗伯逊易位的相关遗传机理提供资料。本研究将克隆得到的端粒简单重复
序列作为探针，采用地高辛随机引物标记法标记探针，对13／17罗伯逊易位猪的染色体标
本片进行荧光原位杂交。以检测罗伯逊易位染色体新着丝粒区域是否存在端粒简单重复
序列。
材料方法
13／17罗伯逊易位猪。来自青岛农业大学实习基地，采猪耳组织，采用SDS酚一氯仿
方法提取DNA，进行端粒的克隆。对13／17罗伯逊易位猪进行前腔静脉采血．培养血细
胞．制取染色体标本片。以克隆得到的端粒重复序列做为探针进行荧光原位杂交。
结果
端粒克隆得至J246bp的端粒简单重复序列，见图1，作为进行荧光原位杂交的探针。
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TAACCCTA．ACCCT
图1重组子测序结果
对13／17罗伯逊易位杂合子猪的中期染色体标本进行荧光原位杂交检测发现。在线性
染色体两端区域均显示端粒杂交信号，而13／17罗伯逊易位染色体只有两端区域显示杂交
信号．杂交信号并末出现在新融合的着丝粒部位(如图2所示)．结果表明13／17罗伯逊
易位产生的新的染色体的着丝粒部位可能不含端粒重复序列DNA。
…，l。
图2荧光原位杂交结果
讨论
本实验采用了二次PcR的嵌套PCR方法对端粒简单重复序列进行扩增，增加了扩增的
特异性。在进行荧光原位杂交时，染色体标本的固定及预处理方法、洗脱强度、标本片
的变性及探针的标记方法等均会影响杂交的效果。萍J13／17罗伯逊易位染色体端粒简单重
复序列的检测可为今后深入研究罗伯逊易位的分子机制提供资料。
关键词：家猪；端粒；13／17罗伯逊易位；荧光原位杂交
致谢：本研究由国家自然科学基金项目资助(No
}通讯作者
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