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批号:110743.200504)。
供,许可号:京动字(2000)第017号。
1.2研究方法
样品环温度80℃,传输温度90℃。
1.2.2溶液的配制 .
1.2.2.1标准液的配制:精密称取冰片标准品10mg,置于50ml容量瓶,加入正已烷至刻度,得到
浓度为200pg/ml的冰片标准品母液,冷藏备用。
标溶液,冷藏备用。 。
中,加入0.05%NaOH溶液201d,冷藏备用。
1.2.3给药方法、灌肠方法及样品处理:称取五色散三剂研细(含冰片4.59),用羧甲基纤维素钠溶
液(浓度10%)调制成50ml药液,药物中冰片浓度为:90mg,ml。每只大鼠给药lml。
1.2.3.1灌肠法:大鼠灌肠前禁食不禁水12小时。给药前轻轻按摩并挤压大鼠肛门周围,促使排出
直肠内积存的粪便,然后用灌胃针头轻轻插入大鼠直肠约2cm,将lml药液缓缓推入,勿将气泡
推入,然后立即用7号线缝合肛门,以防药液外漏。
1.2.3.2动物分组及取材时问点的设定:32只大鼠中的14只分为7组,每组2只,这7组大鼠分别
1.2.3.3前列腺、前列腺加精囊、血液处理方法:解剖取大鼠前列腺与精囊,用生理盐水洗净血迹,
吸纸吸干前列腺表面液体,称重,将前列腺用铝薄包裹、标号,置于.20℃冰柜冷冻保存待处理。
向研磨管内加入2ml提取液、及5微升内标,用匀浆器分两次各低速研磨组织3min,研磨成极细
血浆在室温融化,取lml血浆到5ml离心管,加入lml提取液及5微升内标,在快速旋涡混合器
检测限为O.8p∥ml。在此条件下,冰片中的异龙脑、龙脑峰分离良好。异龙脑、龙脑的保留值分别
14.50rain。
208
2结果
2.1色谱图
3
r””_。r1’’—”1—r”—’—’。
ln j2 j生 啦I
图1冰片对照品与内标图 图2血浆内测出冰片
1异龙脑2龙脑峰3内标 1异龙脑,2龙脑峰,3内标
1TrrPlTTr
图3前列腺组织提取液内测出冰片 图4前列腺加精囊组织提取液内测出冰片
1异龙脑2龙脑峰3内标 1异龙脑2龙脑峰3内标
2.2大鼠前列腺加精囊、前列腺、血浆内冰片含量,见下表
时 间 前列腺加 前列腺昭血浆pg
min 精囊腭
—
5 1.77 0
15 一一 3.29 0
30 36 5 3.66 1.08
45 l7 28 3.34 1.89
60 53 22 17.77 5.17
90 69 89 13.53 8.29
120 53 8 8.72 7.09
m丘禾名口:. .
150 一一 11.73 6.58
180 一一 6.40 3.65
240 3O盘4
360 31.32 一 一
注;因为每个时间点有前列腺、血浆、前列腺加精囊各2个样,故取二者平均值;“一”表示实验
设计在该时间点不取材。
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