牦牛多杀性巴氏杆菌病诊断与药敏试验.pdfVIP

中国牛业科学 2012，38(4)：91—93 ChinaCattleScience 牛病防治 牦牛多杀性 巴氏杆菌病诊断与药敏试验 韩 春 (青海省西宁市湟中县上五庄镇兽 医站 ，青海 湟 中 8116o6) 中图分类号 ：$823 文献标识码 ：A 文章编号 ：lO01—9111(2o12)04一oo91—03 有一牧场地处青海省东部西 宁市湟 中县境 内， 基 (TSB培养基)；胰大豆蛋 白肉汤 30g溶于 1000 海拔 2350m。牧场有 2万 3千多头牦牛。2O11年 mL双蒸水高温灭菌后备用 。 6月牧场的牦牛共发病 79头 ，死亡 53头。临床表现 1．2 病原茵的分离 为高热 (41～42℃)，鼻镜干燥 、眼结膜发绀 、流泪 、 血样采集于死前几小时的病畜 ，将采集 的病料 流涎 、舌及周围组织高度肿胀 、呼吸困难、泌乳和反 划线接种于 TSA平皿 ，37℃培养 (8~24h)后观察 ， 刍停止 、腹痛下痢 、粪便初为粥状 、后呈液状并混有 挑选直径 1～2mm透明光滑湿润的菌落 ，进行革兰 粘液、粘膜片和血液 、恶臭 。部分牦牛头 、颈、咽喉和 氏及瑞 氏染色 (每个平皿挑取 3～7个单菌落染色镜 胸部皮下出现迅速扩散的炎性水肿 。手指按压感到 检)。凡是革兰 氏染色呈单个或成对的细小球杆菌， 热 、硬、痛 。大部分牦牛发病 12～48h后死亡 ，对死 瑞 氏染色呈双极浓染 的细菌为可疑菌落，对其传代 亡的牦牛进 行剖检 ，见其呈败血症变化 ，在全身浆 纯化 ，进一步进行生化鉴定 。 膜 、粘膜 、皮下 、舌 、肺及肌 肉都有散在 的点状 出血 ； 1．3 多杀性 巴氏杆菌 的生化鉴定 全身的淋巴结肿胀、充血 、水肿；胸腔积有多量浆液 分离培养物在进行生化鉴定之前要检查培养物 纤维素性渗出物，部分牦牛咽部炎性水肿 ，水肿延伸 的纯度。将菌株分别划线接种于 TSA平板 ，37℃ 到舌根及舌系带 、以及 咽喉部 、下颌 间隙、颈部 、胸 培养 18～24h。如划线平板上生长 的菌落分布均 前 、甚至前肢的皮下组织 。水肿部 明显肿胀 ，指压皮 匀，有可供观察的一定数量 的单个菌落，通过不 同角 肤时遗有压痕 ，切开水肿部流 出淡黄色液体 。通过 度观察和 比较 ，其有一致性 。如果菌落形态不一致 ， 临床症状 观察及 剖检怀疑为 牦牛多杀性 巴 氏杆 菌 再挑取培养物进行划线培养 ，直 到菌落形态一致或 病 ，并进行 以下试验 。 3／4以上菌落形态一致为止。经涂片革兰 氏染色镜 检 ，在染色特征上应为革兰 氏阴性小杆菌或球杆菌 ， l 材料与方法 菌体形态也一致 ，无杂菌污染时可进行生化鉴定。 1．1 材料 主要做 以下生 化试验 ：葡萄糖 、果糖 、甘露醇 、麦芽 培养基 ：固体 培养基 (TSA 平皿)；胰蛋 白大豆 糖、乳糖 、鼠李糖 、吲哚、MR、VP、硝酸盐还原、并接 琼脂 40g溶于 l000mL双蒸水后备用；液体培养 种麦康凯l1]。结果见表 1。 表 1 本地分离的多杀性 巴氏杆菌 的生化实验结果 注 ：+为 阳性 ；一 阴性 。 1．4 药敏试验 (Kirby—Bauer纸片扩散法) 一 旦贴在某一位置上不应再变动位置 。贴完纸片的 用鉴定好的多杀性 巴氏杆菌 ，挑取单菌落接种 平皿 15rain后置于 37℃培养 1