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s 检测的线性范围为 1 × 10 ~ 1 × 10 M ，检测限为 5.6 × 10 M （3σ）；对 s
1 2
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检测的线性范围为 1 × 10 ~ 8 × 10 M ，检测限为4.1 × 10 M （3σ）。与同种
非 DNA 机器循环放大体系所得结果相比，该结果灵敏度提高了约四个数量级。
将适体传感法与该 DNA 分子机器循环放大体系相结合，对两组分目标分子
ATP 和溶菌酶进行同时的循环放大检测。即首先利用 ATP 和溶菌酶对其适体的
特异性结合力，释放出单链 DNA s 和 s ，再由 s 和 s 引发 DNA 分子机器体系
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的反应。结果表明，对ATP 检测的线性范围为 1 × 10 M ~ 1 × 10 M ，检测限为
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5.6 × 10 M （3σ）；对 s 检测的线性范围为 1 × 10 M ~ 8 × 10 M ，检测限为
2
5.2 × 10-13 M （3σ）。最后，验证了方法的选择性，结果表明，该体系仅对ATP
和溶菌酶产生强的电化学响应，对三磷酸胞苷、三磷酸鸟苷、三磷酸尿苷、凝血
酶以及牛血清白蛋白等相关物质不产生电化学响应。综上所述，该 DNA 分子机
器体系灵敏度高、选择性好、操作简便且且反应过程可控，具有潜在的应用价值。
Ultrasensitive Electrochemical Analysis of Two Analytes by Using An
Autonomous DNA Machine that Works in A Two-cycle Mode
Hui Zhang, Congcong Fang, and Shusheng Zhang*
State Key Laboratory Base of Eco-chemical Engineering，College of Chemistry and
Molecular Engineering ，Qingdao University of Science and Technology，Qingdao
266042，P.R.China.
Abstract: We reported a novel autonomous DNA machine for amplified
electrochemical analysis of two DNAs. The DNA machine carries out a two-cycle
working mode to amplify DNAs recognition events, which is assisted by two different
nicking endonucleases (NEases). Two bio-barcode probes, a
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