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CHINESEJOLq~,_NALOFANATOMYVo1.25No.32002 解剖学杂志 2002年 25卷 3期
实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠穹窿下器的扫描电镜观察
曹翠丽 扬天祝 朱望东 马常升 李学平
(河北医科大学基础医学研究所神经生物室,石家庄 050017)
穹窿下器属于感受性室周器官.缺乏血脑屏障, 胞呈卵石样突人脑室腔 :室管膜细胞表面可见密集 的
可能是外周免疫信息进人脑 内的窗口之一。为证实这 微绒毛(长度为0.5 左右)或乳头状微突起 (长度为
一 观点,我们观察了在外周致敏引起中枢神经系统炎 0.2itm左右)。细胞表面平滑或稍隆起 ,形状规则,均
症情况下,即实验性变态反应性脑脊髓炎(experlmental 为正五边形或正六边形。有的室管膜细胞表面可见单
aI【e cencephalomyelitis,EAE)大 鼠穹窿下器脑室面的 根短纤毛(长度为 2tma--6肿 ).个别细胞可见两根短
形态变化 。 纤毛。胞体大小不一 .直径4 1~10/trn不等,细胞间
界限清晰(图1)。(2)在EAE发病期,可见穹隆下器中
1 材料和方法
11 实验用雌性Wistar大鼠(体重 180-230g)12只.
由白求恩国际和平医院动物场提供。豚 鼠4只(体重
400g±10g,性别不限),由本校动物中心提供。卡介
苗原浆 (80mg/m1)购 自北京生物制品研究所:用 50%
豚鼠脊髓生理盐水匀浆 (重量 /体积比)和 自制完全福
氏佐剂(4nag卡介苗 /m1)充分混匀制成免疫抗原.给
大鼠四足垫内注射 (0.4ral/N)制备 EAE模型。在动
物发病期、恢复期、恢复后期三个时间点 (每组 n=3),
常规经心灌注固定(2%多聚甲醛+125%戊二醛.500
ml/.q),取脑。正常对照组 (n=3)不做任何处理。
1.2 在距离脑底面 3mm处做一水平切 口,将脑块分
为背、腹两半,在背侧半的腹侧面观察到室间孔后.在
室问孔前2mm、后3mm各做道冠状切 口,将腹侧间脑
图 1 正常对照组穹窿下器室管膜细胞 细胞表面光滑,形状
结构掰掉,所暴露的凹弧面即为第三脑室顶面,其正中
规 田9,细胞间界限清晰▲示馓绒毛、△示微 突起、一示纤毛 .
的小丘状突起即穹窿下器 (suMomicalorgt~rt,SFO)。将
SEM观察.×4000
修好的包含SFO的脑块用0.1M 磷酸缓冲液仔细冲
洗 3次,2.5%戊二醛 (4℃)中后 固定 I4天。梯度脱
央区许多室管膜细胞表面有火 山口样结构.直径 1~3
水 ,O 临界点干燥。离子溅射镀金膜后,Hitachis
tan大小不一,从此处可 以看到细胞 内残余 的齿轮状核
,
520扫描电镜下观察 SFO脑室面 的形态改变 。加速 电
样结构 ;并且凡是有此结构 的细胞 ,细胞表面平坦 .其
压为 20KV。 体积均较正常小,细胞不再为规则的正五、六边形 .细
胞阃界限不清 (图2)。室管膜细胞表面的微绒毛、微突
2 结果
起和短纤毛变化不大。在这些细胞周围可见较完整的
2.1 从整体上看,SFO室管膜细胞的脑室面没有纤毛 室管膜细胞,有的表面可见小破孔,胞体大小不一 ,直
或纤毛很少,易于与周围脑室面相区别,室管膜细
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