实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠穹窿下器扫描电镜观察.pdfVIP

CHINESEJOLq~,_NALOFANATOMYVo1．25No．32002 解剖学杂志 2002年 25卷 3期 实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠穹窿下器的扫描电镜观察 曹翠丽 扬天祝 朱望东 马常升 李学平 (河北医科大学基础医学研究所神经生物室，石家庄 050017) 穹窿下器属于感受性室周器官．缺乏血脑屏障， 胞呈卵石样突人脑室腔 ：室管膜细胞表面可见密集 的 可能是外周免疫信息进人脑 内的窗口之一。为证实这 微绒毛(长度为0．5 左右)或乳头状微突起 (长度为 一 观点，我们观察了在外周致敏引起中枢神经系统炎 0．2itm左右)。细胞表面平滑或稍隆起 ，形状规则，均 症情况下，即实验性变态反应性脑脊髓炎(experlmental 为正五边形或正六边形。有的室管膜细胞表面可见单 aI【e cencephalomyelitis，EAE)大 鼠穹窿下器脑室面的 根短纤毛(长度为 2tma--6肿 )．个别细胞可见两根短 形态变化 。 纤毛。胞体大小不一 ．直径4 1～10／trn不等，细胞间 界限清晰(图1)。(2)在EAE发病期，可见穹隆下器中 1 材料和方法 11 实验用雌性Wistar大鼠(体重 180-230g)12只． 由白求恩国际和平医院动物场提供。豚 鼠4只(体重 400g±10g，性别不限)，由本校动物中心提供。卡介 苗原浆 (80mg／m1)购 自北京生物制品研究所：用 50％ 豚鼠脊髓生理盐水匀浆 (重量 ／体积比)和 自制完全福 氏佐剂(4nag卡介苗 ／m1)充分混匀制成免疫抗原．给 大鼠四足垫内注射 (0．4ral／N)制备 EAE模型。在动 物发病期、恢复期、恢复后期三个时间点 (每组 n=3)， 常规经心灌注固定(2％多聚甲醛+125％戊二醛．500 ml／．q)，取脑。正常对照组 (n=3)不做任何处理。 1．2 在距离脑底面 3mm处做一水平切 口，将脑块分 为背、腹两半，在背侧半的腹侧面观察到室间孔后．在 室问孔前2mm、后3mm各做道冠状切 口，将腹侧间脑 图 1 正常对照组穹窿下器室管膜细胞 细胞表面光滑，形状 结构掰掉，所暴露的凹弧面即为第三脑室顶面，其正中 规 田9，细胞间界限清晰▲示馓绒毛、△示微 突起、一示纤毛 ． 的小丘状突起即穹窿下器 (suMomicalorgt~rt，SFO)。将 SEM观察．×4000 修好的包含SFO的脑块用0．1M 磷酸缓冲液仔细冲 洗 3次，2．5％戊二醛 (4℃)中后 固定 I4天。梯度脱 央区许多室管膜细胞表面有火 山口样结构．直径 1～3 水 ，O 临界点干燥。离子溅射镀金膜后，Hitachis tan大小不一，从此处可 以看到细胞 内残余 的齿轮状核 , 520扫描电镜下观察 SFO脑室面 的形态改变 。加速 电 样结构 ；并且凡是有此结构 的细胞 ，细胞表面平坦 ．其 压为 20KV。 体积均较正常小，细胞不再为规则的正五、六边形 ．细 胞阃界限不清 (图2)。室管膜细胞表面的微绒毛、微突 2 结果 起和短纤毛变化不大。在这些细胞周围可见较完整的 2．1 从整体上看，SFO室管膜细胞的脑室面没有纤毛 室管膜细胞，有的表面可见小破孔，胞体大小不一 ，直 或纤毛很少，易于与周围脑室面相区别，室管膜细