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D-乳酸脱氢酶基因克隆及其表达.pdf
卷 期
!! ! 微 生 物 学 报 %’ (!! . (!
年 月
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!乳酸脱氢酶基因克隆及其表达
D D D D
李 剑 唐 ! 梁凤来 马建芳 刘如林
D
（南开大学生命科学学院 天津 7###:D） （天津南开戈德集团 天津 7###:D）
摘 要：构建了一株产 ，乳酸的乳杆菌（ ） 的基因文库。利用乳酸脱氢酶和丙酮酸裂解酶缺
H I6 !#$%#’(()* ,J ( KH6D
陷的 作为宿主，在厌氧条件下通过互补筛选获得乳酸脱氢酶基因（ ），非变性聚丙烯酰胺
+*#,-.’#,’ #%(’ 2KLD!! (/,
凝胶电泳（ ）检测证明其阳性克隆表现出 乳酸脱氢酶（ ）活性。核酸序列分析表明， 的
.3-=M06N)O; H6 H6IHP (/,H QR2
编码 个氨基酸残基组成的蛋白质有两个保守区域，其中 区是 的结合位点， 区据报道是
77D % S H .)HP R S ;
D!: D:5 :: D#:
酶的活性部位。该菌株 和 羟基异己酸脱氢酶（ ）属于 依赖性脱氢酶家族， 和其他乳杆
H6IHP H H6P=CHP .)HP (/,H
菌属的(/,H 及H6P=CHP 基因和编码的氨基酸序列相似性较低，核酸序列相似性最高达!9 T77U ，氨基酸序列相同
性最高为 ，是一个新的 乳酸脱氢酶基因。
! U H6
关键词：乳杆菌 ， 乳酸脱氢酶，基因克隆，表达
KH6D H6
中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ）
V:$ ) ###D65#9 ##! #!6#!9D6#8
乳酸在食品、医药、化工、环保等领域有广泛的 株 + ( #%(’ 2KLD!! 由L03@ H0’C* 教授惠赠。
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