黑曲霉发酵生产壳聚糖工艺研究.pdfVIP

维普资讯 亿 学与生 物 互程 2007．VoI．24No．7 固 Chemistry Bioengineering 黑曲霉发酵生产壳聚糖工艺研究 叶龙祥。刘清斌 (四川理工学院生物工程 系。四川 自贡 643000) 摘 要：采用生物发酵法制备 了壳聚糖。在常用培养基中添加酒糟进行了正交实验，确定培养基组成为：玉米浆 4 、烘干磨碎酒糟 4 、葡萄糖 3 、硫酸镁 1 。得到 了摇瓶发酵和 l5I发酵罐 中的发酵工艺。对发酵罐发酵过程 的 特征参数进行了初步研究。分析 了生物量、pH值、残糖含量、Mg 含量的变化 ，并绘制 出变化曲线。 关键词：壳聚糖；黑曲霉；生物发酵；酒糟；工艺；参数动态分 中图分类号 ：TQ921．7 ()636．1 文献标识码 ：A 文章编号 ：1672—5425(2007)07—0045—04 壳聚糖 (Chitosan，简称 CTS)即脱乙酰基 甲壳素 ， 冈素实验分别确定最佳方案 。再在 已有黑曲霉发酵基 是甲壳素经浓碱溶液处理后脱去乙酰基 的产物，甲壳 础培养基上，加入洒糟，取碳源中葡萄糖 、洒糟及酒糟 素与壳聚糖可分别看作是纤维素 的 C位一OH 基被 形式 3个因素在 3个水平上进行 L (3)正交实验，确 一 (：H ()NIl基和一NH。基取代后的产物 。壳聚 定最佳配方 。 糖是 自然界中唯一大量存在的碱性多糖 ’。 1．2．2 黑曲霉发酵生产壳聚糖在 15I气升式发酵罐 发酵法制备壳聚糖具有一定优势 ，但 目前还处在 中的参数动态分析 实验室阶段 ，发酵前期培养成本较高，菌丝体提高幅度 (1)斜面孢子培养基的制备。 不大 使生产成本相应较高。作者以黑 曲霉为实验材 (2)种子液的培养。 料，研究在常用培养基中加入酒糟为原料培养基摇瓶 (3)发酵液的配制：按 比例配制发酵培养基 ，移入 发酵培养黑曲霉菌丝体的T艺条件 ，并扩大到 15I气 15I发酵罐 中。根据实验室装料经验和许可装料 升式发酵罐 ，对理化参数进行了分析。 12．5I按厂家说明：进行一系列操作，发酵罐压维持 在 0．08MPa，等待接种。 l 实验 (4)发酵：在火焰灭菌 的条件下将摇瓶种子液按 1．1 菌种、原料与仪器 20％的量迅速从加料 口倒入 ，调节空气流量至所需值 黑曲霉 (Aspergillusniger)，四川I理工学院生物 通风量 12．5～15I ·min～，稳定后 ，调 DO读数为 ：_[程实验室提供，冷藏 。 100V00，记录发酵开始的时间，定时取样分析生物量 、残 酒糟，自贡荣县旭川I洒厂；玉米粉 ，市售 ；葡萄糖 糖含量等，直至发酵结束。 (分析纯)，中同医药(集团)上海化学试剂公司。 (5)参数动态分析 ：每 隔 10h取样，平 行测定 3 HH ·BI1·500一BS—II型电热恒温培养箱 ，上海 次 ，取平均值作为测量结果 ，直到菌丝体干重稳定为 医疗器械厂；HZQ—F型恒温培养摇床 ，苏州威尔实验 止 。 用品有限公 闭；D8023CTI一K4型微波炉，广东格兰仕 1．2．3 壳聚糖的提取 集团有限公司；15I气升式外环流发酵罐 ，南京汇科 离心分离得到菌体一洗涤干净一加入 7 氢氧化 生物工程设备有限公司。 钠 50~C下处理 3h一 离心洗涤至 七清液无色一 微波 1．2 方法