胚胎干细胞在临床医学中应用前景.pdfVIP

胚胎干细胞及其在人类疾病治疗中的应用 邱 妍， 谢 冰， 芮 荣 (南京农业大学动物医学院，江苏南京210095) 摘 要：胚胎干细胞是一类多能性干细胞，近年来已成为生命科学研究领域的热点之一。尤 其在人类疾病治疗方面有着诱人的应用前景。本文主要介绍了胚胎干细胞在几种疑难疾病治 疗上的应用及其前景，胚胎干细胞与异种器官移植，以及目前存在的一些问题。 关键词：胚胎干细胞；分化；疾病；移植 胚胎干细胞 （Embryonic stem cells，ES ）来源于着床前的囊胚内细胞团 （ICM ）或早期 胚胎的原始生殖细胞 （PGCs ）。这种多能性细胞可在体外无限增殖并保持未分化状态，适当 条件下也可被诱导分化为各种组织细胞。因此，其在良种家畜的繁育，保护日趋减少的遗传 资源，动物克隆，细胞分化和胚胎发育的研究，基因调控机理等方面表现出重要的意义，尤 其在组织器官的修复与移植治疗上有着潜在的应用价值。近年来，ES 细胞在疾病治疗方面 的独特作用引起了全世界学者的广泛关注。 1 ES 细胞的生物学性质 1.1 形态学特征 ES 细胞的形态结构与早期胚胎细胞相似，胞体体积小，核质比高，细胞核显著，有一 个或两个核仁。细胞呈多层集落状生长，紧密地聚集在一起，细胞界限不清，形似鸟巢。细 胞染色体正常，具有稳定的二倍体核型。 1.2 高度分化潜能 体外培养的 ES 细胞在饲养层细胞上、条件培养基或添加细胞分化抑制因子(如 LIF) 的 特定条件下，均可以维持其未分化状态。一旦将抑制分化的因素去除，ES 细胞能自发地进 行分化。若采用悬浮培养，ES 细胞则可以形成类胚体 （Embryoid body ,EB ）,再利用某些物 质对其进行诱导分化。在体内，若将ES 细胞注射到基因型相同或免疫缺陷小鼠的皮下或肾 囊中，经一段时间后在注射部位可形成由三个胚层细胞组织构成的畸胎瘤。 1.3 遗传稳定性 ES 细胞可在体外培养条件下建立稳定的细胞系，经长期培养增殖、操作、选择克隆、 冷冻保存，仍保持高度未分化状态和发育稳定性。ES 细胞含正常二倍染色体，能稳定传代。 可以在体外对其进行遗传操作，如导入外源基因、标志基因，基因敲除等，通常不会改变其 本身的遗传性能。 1.4 具有特异性标志分子的表达 ES 细胞表面含有丰富的碱性磷酸酶（AKP ）和阶段特异性胚胎细胞表面抗原 （stage-specific embryonic antigens, SSEA ），胚胎特异性抗原有SSEA-1、SSEA-3 、SSEA-4、 TRA-1-60 和TRA-1-81 等。ES 细胞还含有高度表达的Oct-4 基因，高活性的端粒酶。这些 分子都是鉴定ES 细胞多能性的标志分子。 2 ES 细胞的定向分化 从理论上讲，多能性干细胞可分化为体内任何类型的细胞。因此在适宜条件下，可以按 照人们的意愿对 ES 细胞进行定向分化。现有的研究报道表明，ES 细胞在体外可以定向分 化为神经元、神经胶质、胰岛细胞、心肌细胞、横纹肌细胞、平滑肌细胞、软骨细胞、内皮 细胞、脂肪细胞及各类血细胞等。 -1- 对ES 细胞进行定向分化的基本方法是改变细胞的培养条件，主要是向培养基中添加生 长因子、化学诱导剂等，或将ES 细胞与其他细胞一起培养，也可以将ES 细胞接种在适当 的底物上。目前常用于 ES 细胞定向分化的生长因子有：表皮生长因子（EGF ）、血小板衍 生生长因子 （PDGF ）、碱性成纤维细胞生长因子 （bFGF ）、成纤维细胞生长因子2 （FGF-2 ）、 血管内皮生长因子 （VEGF ）、转化生长因子β1 （TGF-β1）、肝细胞生长因子 （HGF ）、神经 生长因子（NGF ）等；常用的化学诱导剂有二甲亚砜（DMSO ）、维甲酸（RA ）。 3 ES 细胞在人类疾病治疗中的应用 对于因疾病造成组织细胞损伤的患者而言，ES 细胞提供了一个器官、组织移植修复的 来源。目前研究较多的是一些多发而又难以治愈的严重疾患，如神经系统疾病、糖尿病、心