热-紫外灭活双亲原生质体融合选育米曲霉新菌株的研究.pdfVIP

维普资讯 2008No．13 · 42 · SerialNo，190 China Brewing R esearchReport 热一紫外灭活双亲原生质体融合选育米曲霉新菌株的研究 王 燕 (乐山师范学院化学与生命科学系，四川 乐山 614004) 摘 要：对米 曲霉 (AS3．951)GIM3．13和CICC2339的原生质体分别进行热灭活及紫外灭活，然后对灭活双亲用PEG(6000)作融合剂 进行原生质体融合 。融合实验最佳PEG(6000)浓度为35％，溶液pH值为7．5，融合率为4．24％。从融合子中选出17株生长速度快、菌落 直径大的融合株，接种到酪素平板上测其Hc值，并与亲本菌株进行比较。结果发现，其中8株融合株的Hc值明显比生长速度快而产酶 量低 的亲本菌株GIM3．13大，菌株16号的Hc值还超过了产酶量高的亲本菌株CICC2339。 关 键 词：米曲霉 ；原生质体；复合灭活；融合 中图分类号：Q813．2 文献标识码 ：A 文章编号：0254—5071(2008)09—0042—02 Researchonnew Aspergillusoryzaebreedingbyprotoplastfusionofthermalandultravioletinactivatedparents 册 j台n (DepartmentofChem~tryLifeScience,LeshanNormalCollege,Leshan614000,China) AbsWact：TheprotoplastsofAspergillusoryzae(AS3．951)GIM3．13andCICC2339wereinactivatedbyheatandultravioletrespectively，andthen protoplastfusionwjt}lPEG (asfluxingagent)wasconductedonthem．Theoptimalufsionconditionswereobmined．Theufsionratecouldreach 4．24％whenthePEG6000concentrationwas35％andthesolutionpHvaluewas7．5．Seventeenufsionswiht fastgrowthandlargecolonydiameter wereselectedforHcdetectiononcaseinplatenadcomparedwithpraentstrains．Theresultsrevealedhtat8ufsionshadhigherHcvaluehtanthe praentstrainGIM3．13，whichhadfastrgowthrateandlow enzymeyield．Besides，No．16ufsionstrainhadhigherHcvaluethanpraentsrtani CICC2339，whichheldhighenzymeyield． Keywords：Aspergillusoryzae；protoplast；inactivation；ufsion 米 曲霉 (Aspergillusoryzae)是酿造业 中的重要微生 吐温、701xg／mL蛋氨酸：固体培养基：马铃薯培养基 (CM)； 物，其生长过程中分泌的蛋 白酶和谷氨酰胺酶等对酱油、 高渗 固体培养基：CM 补加 0．6mol／LNaC1；酪素培养基： 豆瓣、米酒等的产率和风味起着非常重要的作用。然而在