L亮氨酸产生菌TK0303的5L罐分批发酵动力学的研究.pdfVIP

维普资讯 亿 亏 与生 物 Z程 2005，No．7 国 Chem istry Bioengineering L一亮氨酸产生菌 TK0303的5L罐分批发酵动力学研究 宋超先 ，张文生 。谢玉锋 。陈 宁。。张克旭。 (1．天津职业大学生物与环境工程学院，天津 300402；2．哈尔滨学院生命科学与化学学院， 黑龙江 哈尔滨 l50086；3．天津科技大学食品科学与生物工程学院，天津 300222) 摘 要 ：对 L一亮氨酸产生茵黄 色短杆 茵 TK0303(Met一+2-TA + A +口HLr+ SG +Rif800,ug·mL )进行 了5L发酵罐分批发酵试验，该茵株发酵 68h，产 L，亮氨酸26．44g·L一。以5L罐分批发酵试验数据 为依据，对 亮氨 酸分批发酵动力学进行 了研究，建立 了茵体 生长 、产物形成和基质消耗 的动力学模型 ，并应用 MATAIAB软件进行模型 拟合 ，拟舍模 型较好地反映 了 I一亮氨酸分批发酵过程 。 关键词 ：L一亮氨酸 ；分批发酵 ；动力学 ；MATALAB软件 中图分类号 ：TQ922 文献标识码 ：A 文章编号 ：1672—5425(2005)07—0027—03 L一亮氨酸除主要用于医药方面配制复合氨基酸输 在火焰 圈保护下 ．按 l0 接种量将种 子液接人 液外 ，因具有相对较高的抗菌力且低毒 、低刺激性 的特 5L自动控 制发酵罐 (发酵液溶 氧 自动显示 、温度 和 点，在化妆 品、洗涤剂和抗 菌配方 中，有 良好 的开发前 pH值 自动控制)中，装液量3I，通风量200L ·h一， 景…。最新研究表 明：由 L一亮氨酸合成 的多聚物 ，是 搅 拌 转 速 0～ 24h为 600r·min～，24h以后 为 临时创伤敷料的最佳原料之一 2【J，极具发展潜质 。作 500r·min一 ，28℃ 培 养 8h。通 过 自动 流 加 者根据 L一亮氨酸产生菌黄色短杆菌 TK0303(Met一+ 5mol·L NaOH溶液或3mol ·I 盐酸溶液控制 2一TA +a—ABr+8一HI+SG +Rif800 g ·mL )在 pH7．o-_Z-0．1。发酵过程泡沫较多时，加入 已灭菌 的泡 5L罐分批发酵试验 中表现出来的葡萄糖消耗 、菌体生 敌数滴即可迅速消泡。 长和产物 L一亮氨酸 生成 的规律 ，参 考 有关 文 献资 1．4 分析方法 料_3 J，建立 了L一亮氨酸分批发酵动力学模型 。然后 1．4．1 残糖测定 应用 MATALAB软件进行非线性规划拟合 5L罐分 采用 SBA-40C多功能葡萄糖一谷氨酸分析仪测定。 批发酵实验数据 ，得到全局性收敛的最优模型参数和 1．4．2 L一亮氨酸含量测定 拟合 曲线 。 采用纸层析法 、比色定量法测定 】‘ 1．4．3 菌体生长量测定 l 材料与方法 发酵过程 中每 4h吸取 10mI发酵液 ，离心，弃上 1．1 出发菌株 清液 ，用蒸馏水将沉淀物离心洗涤两次后 ，把沉淀菌体 黄色短 杆 菌 (I3revibacterium flavum)TK0303 用2mI．蒸馏水悬浮后转移到干燥皿 中，于 105℃烘干 (M et一 + 2-TA + a-AB + B-HI + SG + R 至恒重 。用 电子分析天平称重 ，所得净重即为菌体干 800 g·mI )，天津科技大学代谢控制发酵研究室 重 (换算为