多肽类物质分析检测方法研究进展.pdfVIP

上海化工 Vol.34 No.11 6 Shanghai Chemical Industry Nov. 2009 · · 专家论坛 多肽类物质分析检测方法的研究进展 杜晓宁 宋明鸣 上海化工研究院 （上海 200062） 摘 要 在蛋白质组学研究中，多肽类物质的分析测定是非常重要和活跃的研究领域，从中可以发现和利用其重要 的生物活性组分，是目前新药物研发的关键。近年来，随着新仪器和检测技术的开发，国内外在研究多肽的 分析检测方法上取得了较大进展。就目前国内外多肽类物质分析测定的最新方法和进展情况加以概述。 关键词 多肽 分析 高效液相色谱 毛细管电泳 质谱 中图分类号 TQ 464.7 56 多肽是一种由 个天然氨基酸以不同组成和 技术和检测仪器不断涌现，对于多肽，无论是在其结 20 排列方式构成的聚合物，当氨基酸残基在 个以下 构测定还是测序方面均取得了巨大的进展。目前，高 20 HPLC CE MS 时称为寡肽，超过 个氨基酸残基则称为多肽，当 效液相色谱（ ）、毛细管电泳（ ）、质谱（ ）及 50 聚合的氨基酸多于 个时，常称为蛋白质。通常在 其联用技术已成为多肽测定的主要手段，并正得到 不严格区分的情况下，寡肽和多肽都称为多肽。 越来越广泛的应用。 多肽广泛存在于自然界中，并对人体有着重要 2.1 高效液相色谱（HPLC）及其联用技术 HPLC 20 60 的生理作用。近年来，随着生命科学研究的蓬勃发 最早出现于 世纪 年代，因其具有 展，有关多肽的研究进展也日新月异。多肽已在免疫 分离效率高、分离速度快等优点，一经面世便迅速解 GC 功能、信息传导、细胞分泌、前体信号、疾病发生及治 决了当时大量不适于利用气相色谱（ ）进行分析 70 疗等方面显示出了神奇的研究应用价值。在对多肽 的物质的分离、分析。特别是自 年代中期以后，电 的结构与功能研究过程中，必然会涉及多肽的测定。 子和计算机技术应用于液相色谱仪，大大提高了仪 目前，多肽的测定主要包括结构的测定（即测定多肽 器的自动化水平和分析精度，加速了HPLC 的发展。 的氨基酸组成、含量）及多肽测序（即组成多肽的氨 近年来随着生物工程和生命科学的迅速发展，为 基酸的连接次序）。本文就目前国内外多肽类物质分 HPLC 分析技术提出了更多、更新的分离、分析要 析测定的最新方法和进展情况加以概述。 求，大大促进了这一技术的迅速发展。特别是微柱液 相色谱、多维液相色谱的出现和电喷雾质谱与液相 1 多肽测定的传统方法 色谱的联用，为生物大分子（如蛋白质、多肽等）的分 传统的多肽结构测定方法是采用柱前或柱后衍 析鉴定提供了强有力的工具。 生的氨基酸分析方法测定多肽水解后得到的各种氨 [2] 吕艳等 采用异硫氰酸