IGF-1与IGF-1R基因在辽宁绒山羊皮肤组织中的表达.pdfVIP

156 中国草食动物科学 2012年专辑 IGF一1和IGF一1R基因在辽宁绒山羊皮肤组织中的表达 刘海英1，宋先忱z，姚玉园3，丛玉艳-，韩迪z，李丰田2，袁缨- (1．沈阳农业大学畜牧兽医学院，沈阳110866；2．辽宁省畜牧科学研究院； 3．大连顺祥牧业有限公司) 摘要：为了研究IG】卜l和IGF_lR基因在绒山羊绒毛生长不同阶段皮肤组织中的表达差异，采用实时荧光定量 PcR技术对非产绒期和产缄期辽宁缄山羊皮肤中IGF—l和IGF-1R基因的表达进行了测定。结果表明：辽宁 关，为进一步研究其对山羊绒性状的影响提供基础数据。 关键词：；IGF-l；IGF-1R；辽宁绒山羊；皮肤实时荧光定量PcR 毛发由毛囊产生，毛囊的周期性变化控制着毛发的 择体况良好，年龄相近(1．5—2岁)成年健康辽宁绒山羊 生长。目前有关毛囊周期性变化的调控机理并不十分明 公羊，分别于非产绒期(5月)和产绒期(10月)在羊体侧 确[I】，但已明确一些细胞因子参与了毛发的周期性调 肩胛部净毛后，用取皮器取lem2左右的皮肤组织，迅速 控，包括类胰岛素生长因子。类胰岛素生长因子一1(IGF-投入液氮中冷冻，随后保存于一80‘C冰箱备用。 1)是类胰岛素生长因子(IGF)家族中的主要成员，研究1．2主要试剂 RNA TotalRNA 表明，IGF一1对毛发的生长发育和周期起到一定调控作 simple Kit(总RNA提取试剂盒)， 用[2-3]，IGF—l能刺激黑素细胞、上皮细胞和毛乳头细胞TIAN RT eDNA第1链合成试剂 ScriptKit(TIANSeript 等各种细胞的增殖和分化[¨】。IGF—l与其受体(IGF一 PCRMaster 盒)，SBRY—Green 1R)结合，通过其受体间的细胞信号途径来刺激毛囊细 量PCR试剂盒)，均购自北京天根生物工程有限公司。 胞增殖[M]，调控皮肤毛囊的生长发育，进而影响被毛生 1．3 长。在绵羊皮肤和毛囊中均有IGF_1和IGF-1R的表达， 安哥拉山羊和克什米尔绒山羊皮肤也存在大量的IGF— 试剂盒提取绒山羊皮肤总RNAt9]，电泳检测完整性，使 IRI S4]。绒山羊具有异质毛被，与绵羊被毛全年持续生长 RT 用微量核酸蛋白测定仪测定其浓度。利用TIANScript 不同，山羊绒的生长随季节呈明显的周期性，不同生绒 eDNA第l链合成试剂盒)进行反转录得 Kit(TIANScript 时期，绒山羊皮肤中IGF_l及IGF-1R基因表达变化情 况尚未见报道。探讨绒毛生长不同时期皮肤中IGF_l及RNA，2p,Loligo(打)，0．51zL 其受体基因表达变化，对绒毛生长的调控机制研究具有 dNTP，4 xFirst-StrandBuffer ScriptM—MIⅣ，2肛L I儿5 重要意义。本试验以辽宁绒山羊为试验动物，以非生绒 RNase-free (rrrr)，2．5ttL ddH20。反转录条件为42℃延 期和生绒旺盛期两个绒毛生长典型阶段为时间点，采用 伸50min，95℃保温5rain终止反应。 实时荧光定量PCR技术，研究不同时期皮肤中IGF—l和1．3．2 mRNA实时荧光定量PCR引物的设计与合成 IGF—IR基因表达，为进一步研究IGF一1在绒山