酵母双杂交技术和其在蛋白质组研究中的应用.pdfVIP

生 物 化 学 与 生 物 物 理 学 报 ISSN ACTA B IOCHIM ICA et B IOPH YSICA SIN ICA 1999 , 31 (3) : 22 1 - 225 CN 3 11300/ Q ·小综述 · 酵母双杂交技术及其在蛋白质组研究中的应用 杨齐衡 　李 　林 ( 中国科学院上海生物化学研究所 , 上海 20003 1 ) 摘要 　　蛋白质组学是在后基因组时代出现的一个新兴的研究领域 , 它的主要任务是识别鉴定细胞 、组织或机体 的全部蛋白质 , 并分析蛋白质的功能及其模式 。因此 , 揭示蛋白质组中蛋白质间的相互作用关系也是蛋白质组学 的重要内容之一 。酵母双杂交技术是用来检测蛋白质间是否相互作用的一个非常有效的手段 。该技术在酵母蛋白 质组研究中的初步成功应用 , 表明它有望在人类蛋白质组研究中发挥重要作用 。 关键词 　　酵母双杂交系统 ; 蛋白质组学 ; 蛋白质蛋白质相互作用 　　作为后基因组时代出现的新兴研究领域之一 , 1 　蛋白质组学的产生背景 ( ) 蛋白质组学 p roteomics 正受到越来越多的关注 。 基因组研究自从开展以来已经取得了举世瞩目 蛋白质组学的研究目标是对机体或细胞的所有蛋白 的成就 。在过去几年中 , 已经陆续完成了包括大肠 质进行鉴定和结构功能分析 。蛋白质组学的研究不 杆菌 、酿酒酵母等十多种结构比较简单的生物的基 局限任何特定的方法 。高分辨率的蛋白质分离技术 [ 1 ] ( ) 因组 DNA 的全序列分析 。线虫 C. eleg ans 的基 如二维凝胶电泳和高效液相层析 , 经典的蛋白质鉴 因组 DNA 测序工作已基本完成[2 ] 。规模更为庞大 定方法如氨基酸序列分析等 , 现代质谱技术 , 基因 ( 的人类基因组计划预期在下一世纪的前几年 2003 组学研究的各种手段 , 现代计算机信息学和计算机 ) ～2005 年 也将完成全部基因组 DNA 的序列分析 。 网络通讯技术等等 , 任何可用于蛋白质研究的技术 这些进展是非常令人振奋的。但是也随之产生了新 手段 , 蛋白质组学都可能会采用 。它体现的是一个 问题 。大量涌出的新基因数据迫使我们不得不考虑 开放的思维和研究方式 。 这些基因编码的蛋白质有什么功能这个问题 。不仅 蛋白质蛋白质的相互作用是细胞生命活动的 如此 , 在细胞合成蛋白质之后 , 这些蛋白质往往还 基础和特征 。这种千变万化的相互作用以及由此形 要经历翻译后的加工修饰 。也就是说 , 一个基因对 成的纷繁复杂的蛋白质联系网络同样也是蛋白质组 应的不是一种蛋白质而可能是几种甚至是数十种 。 学的研究内容 , 相应的工作也已经开展 。 包容了数千甚至数万种蛋 白质的细胞是如何运转 ( ) 酵母双杂交系统 yeast twohybrid system 自建 的 ? 或者说这些蛋白质在细胞内是怎样工作 、如何 立以来已经成为分析蛋白质相互作用的强有力的方