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CE．009 毛细管电色谱的手性分离 邓玉林1·2张建华2顾峻岭1傅若农1 1(北京理工大学化工与材料学院北京100081) 2(CollegeofMcdicinc，univcrs时ofs器kaIchew锄，C锄ada) 1 前言 “ 物质的光学活性已经引起人们的广泛重视，特别是在生物医学和药学等领域，对光学 活性物质的分离制备和分析的要求越来越高。在分子水平上．生物环境实际上是一个手性 环境，生物台成和代谢在相当大的程度上受手性控制01。因而许多药物的不同手性异构体 表现出相当不同的生物活性01。手性分离的困难在于：尽管可以通过选择适当的手性选择 子(clliral∞lector)使其与一对手性异构体间的作用产生差异，但是这种差异常常很弱。 如，Lc和cE已解决了一些手性分离的问题，但是分离选择性弱仍是困扰这些方法的一个 难题。毛细管电色谱(cEc)将色谱传质作用原理和电泳作用原理结合起来。可以为分离提 供更高的选择性。cEc的这一特点被认为或许适合于手性分离。今年初对世界分离学科 中最活跃的十几位学者的调查表明9o：今后lo年内cEc可能是最有发展潜力的分离技术 之一。但是该方法的最终发展将取决于仪器的商品化和理论的定位，即从理论上阐明该方 法较之于HPLc和cE有何独到之处。本文在我们已建立的理论模型的基础上…，用 salsolinol(神经毒素)手性异构体的分离为例子进一步说明cEc的若干特点。 2理论模型 在cEc中，选择性来自于分配和电泳两个不同作用机理的贡献，并且它们的贡献不 是两者的简单加和，因此难以定义一个类似于}玎，Lc中分离因子(口)的有效选择性系数。 为此我们定义一个相对选择性系数口，=(f。2一‘1)，f。2。式中f．为溶质的保留时间·根据该 石 定义得出分离度关系式：R。=竿％。 q 根据溶质在两相间的平衡分配和电泳作用原理，我们导出手性cEC的选择性方程”1。 对于手性固定相cEc： 。．：!坠2：鱼2 (1) 1 l+雄+群f2 式中，庐是相比：局为溶质和手性选择子的形成常数； 足为溶质在两相间的分配常数。 对于流动相cEc： 。：!坠L二生!垡竺生!选二丝幽刍 ’ (1+庐K+xf2c。)(vf+K珞lc。) 3实验部分 (1) CEC，PD．CEc)系统 压力流驱动CEC(Pressure-driven 参照Tsudal”的方法建立了PD《Ec装置。压力泵作为流动相的主要驱动装置。高压 ．808． 电场施加在毛细管柱的两端。分离柱为本实验室自制，采用匀浆法装填”o。 (∞sal∞linoI的手性分离 分别采用手性固定相和手性流动相方法分离sals01inol的光学异构体。手性固定相方 动相，20mmoⅥ。磷酸缓冲液(pH5．7)-甲酵(2．5％)。手性流动相方法的分离条件：色谱柱， Instrument ODS键合固定相(Rainm 3．O)一12mmoI，L 冲液(pH cyD．5mmol，L庚烷基磺酸钠(sHs)。利用我们以前报道的方法91， 通过实验估算cyD-sals01jnol光学异构体的形成常数。 4结果与讨论 (1)手性分离的选择性 在手性分离中，选择性应该包括两个方面的贡献：一是内在差异(iI晡雎ic∞lecⅡvity)， 即形成常数的差异(公式中的△蜀)；另一个是将内在差异转化成表观差异(沿色谱柱的迁 移速度)的效率，即转换效率(exog∞o∞鲥ec￡；vi砂． (2)手性固定相cEc 由式(1)可见，手性柱CEC的分离选择性取决于形成常数上的内在差异(△j鼬和分配 作用的转换效率，电泳作用机理不影响此分离模式的选择性．电场的贡献仅仅是作为流动 相的驱动力，提高色谱柱效率。