一种用阴极荧光与研究蛋白质盐水溶液方法.pdfVIP

ChinEtHtrMicmse‰ 电fa镦学报J ∞H。183—1832010《 一种用阴极荧光研究蛋白质盐水溶液的方法 黄凯，邱永鑫，赵庆欢，曾雄辉，张智军，张锦平 (中科院苏州纳米技术与纳采仿生研究所，江苏苏H215125) 本文通过对NaCI压牛血清白蛋白(BSA)样品 中尤基底干扰信号。其次，为减少样品在电子柬辐 的电子束诱发cL光谱的测定和分析．探索一种研 照下的损伤．同时获得可观察的cL谱．最们选用不 究生物样品微观结构的新方法。实验所用测试仪器 同加速电压进行了测试，最终确定使用3kV的加速 为FEI 400 QuantaFEG热场发射扫描电镜．配备 电压。在上述优化测试条件下．不同浓度NaCI溶液 Mono Gatan CL3+阴极荧光谱仪，探测器有救波长样品以厦NaCI晶体的cL测试结果如图1所示，由 ＆目约200…900。 倒可见它们的cL发光峰峰位基本一致．约为400 实验中，用不同浓度的NaCI溶液及BSA与nm及535 D Townsend对氯化钾 Hm，与Yang和P NaCI的混合溶液，分别滴在硅片和石墨基底上，经 晶体的cL观察结果相似。。 自然干燥后进行CL测试．发现采朋石毋基底CL谱 ， ＼ f 、 ( ／ ＼ ^1 J ／ ＼ I ／p ／ ／， 、、 ＼、 ／。 ／ 、 ， ＼＼ ／／ r ＼‰、 ～ 少 目l {月滩度样品厦Nacl晶体nc【ⅫE镕$。 对加入NaCl的BSA溶液样品进行cL测试(囤的BSA蛋白的发光基团色氨酸在330 nm处的荧光 2)．发现其最强峰为425nm，在该波长对样品进行 最大发射峰基本吻合。另外，BSA中加八NsCI后。 了cL成像分析，囤3即为同一区域SEM二次电子原本Hacl在535 nm的谱峰消失，说明BSA使NncI 像与cL像的叠加像，其中绿色部分为渡跃为425的能带结构发生变化，使利用利用电子束诱发的阴 nm cL像；结合能潜分析可确定其中NaCI台每要明投荧光谱研究牛物结构成为可能。 显高于不发光部分。通过与NaCI样品的CL谱时参考文献 Pn 比，发现在300…350范围内，加^了BSA样品iI]YangB．TownsendPl·y*SlatSol(B)，1993，178： 的cL谱中多出一峰．峰位约320 533 nm，这与文献报道 目3日一E#SEM一次自f*S 圊2∞^Nec】的BSA镕涟舳cL测*结果