介导RNAi的病毒载体的研究进展.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) 细胞。相反，VSV-G假型慢病毒载体仅转导实体瘤内的少数肿瘤细胞和肿瘤周围的多数神经元。这 些结果表明了LCMV-WEGP假型化HIV-I载体用于治疗恶性胶质瘤的潜在价值。 GP假型化FIV载体 近来报道，将表达p．半乳糖苷酶(galactosidae，gal)的LCMV-WE zone，svz)内的星形胶质细胞、沿吻侧迁移流(rostralmigratory 神经元。这种模式提示位于SVZ神经干细胞／前体细胞的转导，并不断产生嗅球神经元。因此， 且可能是治疗神经性疾病的有价值的基因转移载体。 4 a病毒糖蛋白假型化病毒载体 a病毒表现出广泛的细胞嗜性包括基因治疗的重要靶标如抗原递呈细胞、神经元和肌细胞，用其 fiver 白假型化FIV慢病毒，将罗斯河病毒(ross 胶质细胞和少突胶质细胞)，与VSV．G主要靶向神经元不同，RRV假型化病毒载体转导脑细胞中神经 元占的比例小于10％。这些数据表明RRV／FIV载体对肝细胞和神经胶质细胞的转导的特异性。 近来，Strang等建立了产生RRV和塞姆利基森林病毒(semliki 型化HIV-1慢病毒载体的稳定包装细胞系。尤其是RRVE2E1克隆能稳定产生高滴度假型化病毒至 少达5个月，并且RRV假型化病毒表现出的许多特点也是非常诱人的，包括对人新鲜血清中不耐热 7感 补体灭活的抗性和在370c的热稳定性，而且通过一步超速离心浓缩假型化HIV-I，就能获得6×10 染单位(infectiousunit，IU)／ml的病毒滴度。 的不同部位，结果发现神经元和神经胶质细胞被有效转导。通过使用神经元-特性烯醇化酶和神经胶 质酸性蛋白2个细胞特异性启动子，证明了细胞特异性转基因在所预期的细胞中得到表达。而且， RRV糖蛋白假型化慢病毒载体在体外也能转导入神经前体细胞，表明人神经细胞上存在RRV糖蛋 白的受体。这些结果表明RRV糖蛋白假型化慢病毒载体用于一些神经性疾病基因治疗的潜力。 5结语 deaminase 酶缺乏症(adenosine 疗手段取得了重大研究进展，然而在解决人类疾病方面，其效率仍然很低，这在很大程度上与目的基 因导入靶细胞并使之表达的载体有关，假型化病毒载体因其独特的性质——可通过表面糖蛋白改变宿 主范围、性质稳定易于浓缩、安全并可高效转染静止细胞等——无疑给基因治疗注入了新的活力。 参考文献(编者略) 介导RNAi的病毒载体研究进展 郑玉姝，赵朴，刘兴友，赵坤，姚四新，刘丽艳，王宪文 (河南科技学院动物科学学院河南新乡453003) RNA干扰(RNA RNA(smallinterfering 调控能力，现已广泛应用于基因功能和人类疾病模型的研究，包括药物靶标的筛选，候选药物的潜 在副作用分析、基因治疗的测试和功能缺失筛选等． 年来，介导RNAi的病毒载体取得了很大的研究进展．-—转染效率大大提高，实现了特定的靶组织或 的进一步应用奠定了基础，以下将根据各载体的特点就这方面的最新研究进展做以介绍，以供参考． 中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) l稳定长效RNAi载体 siRNA的长期表达对基因治疗是必须的，可通过反转录病毒载体获得。反转录病毒载体能高效 感染分裂相和非分裂相细胞，将自身携带基因片段整合入宿主细胞基因组，在哺乳动物各类细胞内 稳定表达siRNA，长期抑制基因表达。对常规转基因方法难以奏效的转化细胞系和原代树突状细胞， 反转录病毒载体也能稳定沉默靶基因，包括正常人成纤维细胞中的肿瘤抑制基因TP53。 blood 动子的慢病毒载体在原代人外周血淋巴细胞(peripheral 结果发现在表达shRNA和降低趋化因子受体5(chemokine