丁苯酞对缺氧缺糖条件下血管内皮细胞VEGF和HIF-1α表达的影响.pdfVIP

ChineseJoumalofPathophysiology 2011，27(4)：643—647 · — — 643 · [文章编号】 1000—4718(2011)04—0643—05 丁苯酞对缺氧缺糖条件下血管 内皮细胞 VEGF和 HIF一10表【达的影响木 殷建瑞 ， 张 波 ， 谭丽华 ， 傅 贤 ，魏 欢 ， 李 玲 (’广州医学院第二附属医院神经内科，广东 广州510260；昆明市延安医院，云南 昆明650051； 中山大学附属第一医院神经科 ，广东 广州510080) [摘 要] 目的：探讨丁苯酞(NBP)保护缺氧缺糖 (OGD)细胞损伤的机制。方法：对人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)予以OGD损伤 ，MrIT法检测细胞活性；Hoechst33342染色检测细胞核形态；免疫荧光法观察血管 内皮 生长因子 (VEGF)和缺氧诱导因子 一10【(HIF一1)表达 ，IPP软件分析荧光强度，进行定量分析 ；Westernblotting检 测加以验证。结果：NBP在0．01—10txmolfL浓度之间剂量依赖性减少了OGD导致的细胞活性下降和细胞核形 态改变。NBP促进了OGD后HUVECs内VEGF和 HIF—la的表达 ，均高于 OGD组，荧光定量分析差异显著。两 者表达的高峰分别为 OGD后6h和8h。结论 ：NBP可以促进内皮细胞在缺氧缺糖条件下HIF—let的表达，从而 引起下游VEGF的表达增多，最终保护内皮细胞免受缺氧缺糖损伤。 [关键词] 丁苯酞；血管内皮细胞；缺氧缺糖；血管内皮生长因子；缺氧诱导因子一1 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．04．004 EffectsofNBPonexpression0fVEGF andHIF—lotinHUVECsunder theconditionofoxygen——glucosedeprivation YINJian一1111一，ZHANGBo ，TAN Li—hua ，FUXian ，WEIHuan ，LILing (DepartmentofNeurology，SecondAffiliatedHospital，GuangzhouMedicalCollege，Guangzhou510260，China；Yanan Hospital，Kunming650051，China ；DepartmentofNeurology，FirstAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guang- zhou510080，China．E—mail：bozhang．1982@yahoo．corn．ca) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethemechanismthatdl一3一n—butylphthalide(NBP)protectscellsfromthe injuryinducedbyoxygen—glucosedeprivation(OGD)．METHODS：Humanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs) wereexposedtoOGDtoinduceendothelialdamage．Endothelialinjurywasassessedbymeasuringthechangesofchromatin morphologyandMrrImethod．Theproteinlevelsofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)nadhypoxiainduciblefactor 一 1alpha(HIF—let)weredeterminedbyimmunofluorescenceandquantitativelyanalyzed