胚胎干细胞源性肝干细胞在治疗性肝再生中的应用.pdfVIP

维普资讯 · 1322· 生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2007,23(7)：1322-1325 [文章编号] 1000—4718(2007)07—1322—04 胚胎干细胞源性肝干细胞在治疗性肝再生中的应用 宋尔卫， 闵 军， 张 杰 ， 陈 伦 ， 曾炳胜 ， 方天翎 ， 陈积圣 (中山大学附属第二医院；bJL~b科，广东 广州 510120) [摘 要] 目的：应用治疗性肝再生模型进行胚胎干细胞 (ESC)源性肝干细胞肝内移植，观察其在肝组织替 代、体内的生长分化及成瘤性等情况，为ESC移植在难治性肝病治疗中的临床应用提供实验依据。方法：倒千里 光碱 +70％肝部分切除建立 BALB／e小鼠的治疗性肝再生模型。用荧光示踪剂CFDASE标记移植细胞 ，将经淤胆 血清 “病理微环境”筛选体系筛选出的ESC源性肝干细胞经门静脉移植入治疗性肝再生模型小 鼠肝内。然后荧光 显微镜下观察 ，检测移植细胞体内分布 、整合与肝细胞替代、体内生长分化等情况。2周后行白蛋白荧光免疫组化 (双荧光染色)、血清 白蛋白水平检测其功能状况。并通过观察其体内成瘤性对筛选出的ESC源性肝干细胞的安 全性进行评估。结果：CFDASE标记的ESC源性肝干细胞肝内移植 1周，受体小鼠肝实质内可见散在绿色荧光分 布。2周后，肝实质内绿色荧光分布区域明显扩大，且可见类似肝索样结构排列。共焦 白蛋白荧光免疫组化 (双荧 光染色)结果表明，受体小鼠肝组织内可见标记细胞表达 白蛋白阳性信号 (呈黄色荧光)，血清 白蛋白水平则无明显 差异 (P0．05)。6周内未见畸胎瘤形成，而将未分化的ESC移植入小鼠腋区皮下6周后则可见畸胎瘤形成。结 论：经淤胆血清 “病理微环境”筛选体系筛选出的ESC源性肝干细胞移植入治疗性肝再生模型小鼠肝内后可有效 整合入宿主肝板、在肝内能进一步生长分化并部分表达肝细胞功能。其安全性较好，6周内未见畸胎瘤形成。 [关键词] 胚胎干细胞；肝细胞移植；细胞分化；肝再生 [中图分类号] R363 [文献标识码] A ApplicationofESC ·-·derivedhepaticstem cellsin therapeuticliverrepo· pulation DENGXiao—geng，SONG Er—wei，MIN Jun，ZHANGJie，CHEN Lun，ZENG Bing— sheng，FANGTian—ling，CHEN Ji—sheng (DepartmentofPediatricSurgery，TheSecondAffiliatedHospitalofSunYat—senUniversity，Guangzhou510120，China． E—mail：dengxiaogeng@yahoo．corn．cn) [ABSTRACT] AIM：Tostudytheproliferation，differentiationandthecapacityofformingteratomasofESC—de· rivedhepaticstem cellsinmousepre—treatedwithretrorsineand70％ partial hepatotomy．M ETHODS：TheESC—de— rivedhepaticstem cells，labelledwithCFDA SE，weretransplantedintoBALB／cmouseliver．Thedistribution，ineorpera— tionandproliferationoftransplantedcellswereobservedunderfluorescentmicroscopy．Hepaticfunctionwasassayedbyde— tectingalbuminlevelinserum．T