上／下调miR-21对结肠癌细胞的生物学作用及对西妥昔单抗药物敏感性的影响.pdfVIP

志 ChineseJournalofPathophvsiology 2014．30(4)：609-614 [文章编号] 1000-4718(2014)04．0609．06 上 ／下调 miR2·1对结肠癌细胞 的生物学作用 及对西妥昔单抗药物敏感性的影响 巩 波 ， 李东风。， 谢子钧 ， 段伊帆 ， 李子俊 (南方医科大学，广东 广州510515；广东省人民医院，广东省医学科学院 消化科 ，医学研究中心 ，广东 广州510080) [摘 要] 目的：探讨 miR-21在结肠癌细胞中的生物学功能及对 EGFR单抗西妥昔敏感性的影响。方法： 通过慢病毒载体的构建及包装生成上调／下调miR-21的慢病毒LV．miR-21和LV．anti．miR-21并感染人结肠癌RKO 细胞，采用 qRT—PCR、MTr、非锚定依赖性细胞生长、流式细胞术、CCK-8等技术检测上调／下调miR-21后细胞的 miR-21表达水平、细胞增殖、克隆形成能力、细胞凋亡能力及对西妥昔单抗药物敏感性的变化。结果：LV．miR．21 与LV-anti-miR-21慢病毒的滴度分别为3．0×10 TU／L和2．0×10 TU／L，将病毒颗粒分别感染人结肠癌RKO细 胞 ，观察绿色荧光 ，感染效率在80％以上。LV．miR-21组的miR-21表达水平、细胞增殖能力和克隆形成能力均高于 LV—anti—miR-21组，差异有统计学意义 (P0．05)。而LV-nati—miR-21组的细胞早期凋亡率及西妥昔单抗对细胞的 抑制率均高于LV—miR-21组(P0．05)。结论：miR．21可促进结肠肿瘤细胞的增殖。下调 miR-21可以增加结肠 癌细胞对靶向治疗药物西妥昔单抗的敏感性。 [关键词】 结肠肿瘤；miR-21；西妥昔 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2014．40．006 Up／down-regulationofmiR-21changesbiologicalfunctionofcoloncan- cercellsand sensitivitytocetuximab GONGBo ，LIDong．feng，XIEZi-jun，DUANYifan，LIZi—jun (SouthernMedicalUnive~ity，Guangzhou510515，China；DepartmentofGastroenterology，MedicalResearchCenter， GuangdongAcademyofMedicalSciences，GuangdongGeneralHospital，Guangzhou510080，China．E-mail：zijunli2005@ aliyun．com) [ABSTRACT] AIM ：ToexploretheeffectsofmiR-21onbiologicalbehaviorofcoloncnacercellsandtheirsensi— tivitytoepidermalgrowthfactorreceptormonoclonalantibodycetuximab．METHODS：Lentiviralvectorswereconstructed togenerateup anddown．regulationsofmiR-21lentiviruses(LV—miR-21andLV—anti-miR-21，respectively)，nadthecor- respondingnegativecontrolviruses(LV-miR一21NCnadLV-anti-miR-21NC，respectively)werealsoconstructed．Thevi— urseswereusedtoinfecthumna coloncancerRKO cells．ThechangesofthemiR-21expressionlevel，thecellprolifera— tion，thecolony—fomr ingability