细胞自噬在糖尿病大鼠椎间盘退变中的作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(11)：2011-2016 · 2011 · [文章编号】 1000—4718(2013)11-2011—06 细胞 自噬在糖尿病大 鼠椎 间盘退变中的作用 郑旭浩， 张小磊， 江立波， 胡旭琪， 金永龙， 郑亦静， 吴 畏， 徐华梓 (温州医科大学附属第二医院脊柱外科，浙江 温州 325000) [摘 要] 目的：探讨凋亡和自噬水平在糖尿病大鼠椎间盘髓核组织中的变化及其作用。方法：sD大鼠注 射链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病模型16周后，完整获取大鼠腰椎间盘，经石蜡包埋切片、苏木素．伊红(HE)染色和 阿里新蓝染色 ，在组织水平检测椎间盘病理变化。DNA原位末端标记法(TUNEL)检测髓核细胞凋亡率，免疫组织 化学及Westernblotting方法检测髓核组织凋亡和 自噬水平。结果：HE和阿里新蓝染色显示糖尿病大鼠椎间盘发 生退变。和正常组相比，caspase-3阳性细胞 比例在糖尿病大鼠椎间盘中明显增加。TUNEL结果显示糖尿病大鼠椎 间盘髓核细胞凋亡率升高。Westernblotting和免疫组织化学检测发现 自噬指标LC311／LC3I和beclin．1表达量在 糖尿病大鼠组均高于正常组。结论：STZ诱导的糖尿病可加速大鼠椎间盘退变，并且提高了髓核组织中凋亡和自 噬水平。 [关键词] 椎间盘退变；糖尿病 ；自噬；细胞凋亡 [中图分类号] R329．25 [文献标志码] A d0i：10．3969／j．issn．1000—4718．2013．11．017 Roleofautophagyin intervertebraldiscdegenerationin diabeticrats ZHENGXu-hao，ZHANGXiao·lei，JIANGLi—bo，HUXu—qi，JINYong—long，ZHENGYi— iing，WUWei，XUHua—zi (DepartmentofspineSurgery，theSecondAffiliatedHospitalofWenzhouMedicalUniversity，Wenzhou325000，China． E-mail：spinexu@163．corn) [ABSTILS．CT] AIM ：Toexplorethelevelsofapoptosisandautophagyinthenucleuspulposustissuesofinterverte- braldiscsindiabeticrats．METHODS：Sixteenweeksafterinjectionofstreptozocin(STZ)，thelumbarintervertebral discswereobtainedfromtherats．Thehistologicalchangeswereobservedbyhematoxylin—eosin(HE)stainingandaleian bluestaining．Theapoptosisofthenucleuspulposuscellswasmeasuredbythemethodsofterminaldeoxynucleotidyltrans— ferase-mediatednick-endlbaeling(TUNEL)，immunohistochemistry，andWesternblotting．Thelevelofautophagyinthe nucleuspulposuscellswasdetectedbyWestern blottingna dimmunohistochemistry．RESULTS：Comparedwiht normal group，HE andaleianbluestainingsuggestedthattheintervertebraldiscsofthediabeticratsbecamedegenerate．Theexpres— sionofcaspase-3andtheapoptoticratewereincreasedinintervertebral discnucleuspu