新型融合多肽HTPP-MDC体外抑制HBV复制活性及亚细胞定位.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013。29(7)：1283．1287 · 1283 · [文章编号] 1000．4718(2013)07．1283．05 新型融合多肽 HTPP—MDC体外抑制 HBV 复制活性及亚细胞定位 木 卢雪梅 ， 黄演婷 ， 汪 洁 ，金小宝 ， 朱家勇 (。广东药学院药用生物活性物质研究所 ，广东省生物活性药物研究重点实验室，广东 广州510006； 南方医科大学公共卫生与热带医学学院，广东广州 510515) [摘 要] 目的：研究肝细胞靶向穿膜肽一家蝇天蚕素 (HTPP．MDC)融合多肽体外对乙型肝炎病毒(HBV) 的抑制作用及其在肝细胞中的定位。方法：不同浓度HrI胛 ．MDC分别与HepG2．2．15细胞和Changliver细胞共培 养，用四甲基偶氮唑盐(MYr)比色法检测药物对细胞的毒性作用，应用 ELISA和实时荧光定量 PCR技术定量研究 HIPI’一MDC对HepG2．2．15细胞系分泌HBsAg、HBeAg及 HBVDNA复制的影响。应用激光共聚焦技术研究H11PP． MDC在肝细胞中的定位。结果：HrPP-MDC在体外能有效抑制HepG2．2．15细胞系分泌HBsAg和HBeAg，对HBV DNA的复制亦有显著抑制作用。激光共聚焦显微镜观察显示 H11PP．MDC进入细胞内部。结论：HTPP—MDC在体 外对 HBV复制有较强的抑制作用，并能快速透过细胞膜进入细胞内，有望用于临床治疗慢性乙型肝炎相关疾病。 [关键词】 肝细胞靶向穿膜肽；家蝇天蚕素；融合多肽；肝炎病毒，乙型 [中图分类号] R965 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000．4718．2013．07．024 HTPP．MDC inhibitsreplicationandsubcellularlocalizati0n0fhepatitisB virusinHepG2．2．15cells LUXue．mei’，HUANGYan．ting ，WANGJie，JINXiao．bao ，ZHUJia．yong△ (Institute PharmaceuticalBioactiveSubstances GuangdongPharmaceutcialUniversity，GuangdongKeyLaboratoryof PharmaceutcialBioactiveSubstances，Gnangzhou510006，China；School0，PublciHealthandTropicalMedciine，Southern MedcialUniverstiy，Guangzhou510515，China．Email：zhujy@g@u．edu．cn) [ABSTRACT] AIM_．Toinvestigatetheantiviraleffectofhepatocyte—targetingandcell—penetratingpeptidenad Muscadomestciaceeropin(HTPP—MDC)fusionpelypeptide~ insthepatitisBvirus(HBV)invitro，andtoobservethe penetratingabliityofHTPP-MDCinhepatocytes．M ETHODS：HepG2．2．15cellsna dChnagliverceUswereco-cultured invtirowithHTPP—MDCatdifferentconcentrations．MTrassayWas usedtodetectthecytotoxieityofHTPP-MDC invitro． ThelevelsofHBsAg，HBeAgnadHBVDNA inHepG2．2．15cellculturesupematantsweremeasuredbyELISAandreal- timefluorescencequnatitativePC