血管紧张素Ⅱ对人单核细胞源树突状细胞免疫功能的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(4)：681-685 · 681 · [文章编号] 10004·718(2014)04—0681-05 血管紧张素 Ⅱ对人单核细胞源树突状细胞 免疫功能的影响木 黄 东， 陆 浩， 姚 康， 孙爱军， 邹云增， 葛均波 (复旦大学附属中山医院心内科 ，上海市心血管病研究所 ，上海200032) [摘 要】 目的：探讨血管紧张素 II(AngII)对人单核细胞源树突状细胞(DCs)免疫成熟进程及摄取氧化低 密度脂蛋白(Ox．LDL)功能的影响。方法：采用密度梯度离心结合免疫磁珠法分离人外周血CD14 单核细胞，经含 100峭／L重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和50 L重组人IL-4(rhlL-4)的RPMI-1640培养液 培养，诱导分化为未成熟DCs。经不同浓度的AngII干预24h，另用 10I~mol／L血管紧张素II受体 1拮抗剂洛沙坦 预处理后再加入AngII干预，采用流式细胞术检测细胞免疫表型 (CD83和 HLA—DR)，酶联免疫吸附试验 (ELISA) 法检测细胞培养上清液中细胞因子 (IL-l2和 IFN_·y)的浓度；通过加入 10ms／L的荧光DiI标记的Ox-LDL，用流式 细胞仪检测DiI．Ox．LDL的摄取分数；采用real-timePCR法检测清道夫受体 A(SRA)、CD36和凝集素样氧化低密 度脂蛋白受体 1(LOX．1)mRNA的表达。结果：(1)AngII干预可上调DCs表面成熟标志物CD83和HLA-DR的 表达，且分泌细胞因子IL．12和IFN-水平升高，10~moVL洛沙坦预处理可明显抑制 AngII诱导的DCs成熟。 (2)AngII干预可促进DCs对DiI-Ox—LDL的摄取，洛沙坦预处理可部分抑制DCs对 DiI-Ox-LDL的摄取。(3)Ang II干预可上调LOX．1mRNA的表达，但对SR-A和CD36的表达无明显影响，洛沙坦预处理可明显抑制LOX·lmRNA 的表达，但 SR．A和CD36的表达无明显变化。结论：AngII可促进 DCs的免疫成熟，并且可能通过上调LOX一1的 表达，促进 DCs对Ox．LDL的摄取 ，这可能是AngII促动脉粥样硬化的新机制。 [关键词] 树突状细胞；氧化低密度脂蛋白；血管紧张素II；洛沙坦；凝集素样氧化低密度脂蛋白受体 1 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2014．40．019 Innnunematuration ofhuman monocyte．derived dendriticcellsinduced byangiotensin II HUANGDong，LUHao，YAOKang，SUNAi-jun，ZOUYun—zeng，GEJun—bo (DepartmentofCardiology，ShanghaiInstituteofCardiovascularDiseases，ZhongshanHospital，FudanUniversity，Shang- hai200032，China．E-mail：ge．junbo2@嚣一hospita1．sh．cn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectsofangiotensinII(AngII)ontheimmunematurationandtheoxi- dizedlow-densitylipoprotein(Ox—LDL)-uptakingcapacityofhumna monocyte-deriveddendriticcells(DCs)．METH- ODS：Humna peripheralbloodmononuclearcellswereisolatedbydensitygradientcentrifugation，andthemonocyteswere purifiedbyposi